Imaging och 3D rekonstruktion av Cerebrovascular Structures i embryonala Zebrafish

Zebrafisk är ett kraftfullt verktyg för att studera utvecklingsbiologi och patologi in vivo. Den lilla storleken och den relativa öppenheten i zebrafisk embryon gör dem särskilt användbara för visuell undersökning av processer såsom hjärta och kärl-utveckling. I flera nya studier transgen zebrafisk som uttrycker EGFP i vaskulära endotelceller har använts för att avbilda och analysera komplexa vaskulära nätverk i hjärnan och retina, med användning av konfokalmikroskopi. Beskrivningar finns för att förbereda, behandla och bild zebrafisk embryon som uttrycker förbättrade grönt fluorescerande protein (EGFP), och sedan generera omfattande 3D-renderingar av cerebrovaskulär systemet. Protocols inkludera behandling av embryon, konfokal avbildning, och fixeringsprotokoll som bevarar EGFP-fluorescens. Vidare är bra tips på att få bilder av cerebrovaskulära strukturer, till exempel avlägsnande av ögat utan att skada närliggande nervvävnad av hög kvalitet tillhandahålls. Potentiella fallgroparmed konfokal avbildning diskuteras, tillsammans med de åtgärder som krävs för att generera 3D-rekonstruktioner från konfokala bildstaplar med hjälp av fritt tillgänglig programvara med öppen källkod.