JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Chemistry

Нецелевые Метаболомики из биологических источников Использование UltraPerformance жидкостной хроматографии высокого разрешения масс-спектрометрии (UPLC-HRMS)

Published: May 20th, 2013

DOI:

10.3791/50433

1Centers for Cancer Pharmacology and Excellence in Environmental Toxicology, Department of Pharmacology, University of Pennsylvania

Здесь мы представляем рабочий процесс для анализа метаболических профилей для биологических образцов, представляющих интерес, включая, клетки, сыворотка, или ткани. Образец сначала разделяют на полярных и неполярных фракций путем жидкостно-жидкостной экстракции, и частично очищенный для облегчения ниже анализа. Обе водные (полярные метаболиты) и органические (неполярные метаболитов) фазы первоначальной экстракции обрабатываются для обследования широкого спектра метаболитов. Метаболиты отделены друг от различных методов жидкостной хроматографии на основе их свойств раздела. В этом методе, приведем микропотоке ультра-производительность (UP) LC методы, но протокол является масштабируемой более высоких потоков и низком давлении. Введение в масс-спектрометр может быть достигнуто путем общего или соединение оптимизированных условиях источника. Обнаружение широкого спектра ионов осуществляется в режиме полного сканирования как положительные, так и отрицательные режиме в широком м / з диапазон при высоком разрешении на недавно Calibrated инструмента. Без наклеек дифференциальный анализ осуществляется на платформах биоинформатики. Применение этого подхода включают метаболические пути скрининга, биомаркеров и разработки лекарственных препаратов.

Explore More Videos

75

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved