Flybar: Администрирование Алкоголь в мух

Плодовые мушки (дрозофилы) являемся известной модели как для исследования алкоголя и циркадных биологии. Недавно мы показали, что циркадные часы модулирует чувствительность алкоголя, но не формирование толерантности. Здесь мы описываем наш протокол подробно. Алкоголь вводят мух с использованием Flybar. В этой конфигурации, насыщенных паров алкоголя смешивается с увлажненным воздухом в заданных пропорциях, и вводили мух в одновременно четырех трубок. Мухи выращивают в стандартных условиях с целью минимизации Разница между повторами. Трехдневные старые мухи разных генотипов или лечения используются для экспериментов, предпочтительно путем сопоставления мух двух различных временных точках (например, КТ 5 и СТ 17) принятие возможно прямое сравнение. В ходе эксперимента мухи подвергаются в течение 1 часа в заранее определенном проценте парами спирта и количества мух, которые демонстрируют утрата установочного рефлекса (Lorr) или седAtion подсчитываются каждые 5 минут. Эти данные могут быть проанализированы с использованием трех различных статистических подходов. Во-первых, определить время, при которой 50% от мух потеряли свою рефлекса и использовать анализ дисперсии (ANOVA) для определения того, существуют ли значительные различия между моментами времени. Вторая заключается в определении процентных мух, которые показывают Lorr после определенного количества минут, а затем на основе анализа ANOVA. Последний метод является анализ временных рядов весь помощью многомерного статистического анализа. Протокол также может быть использован для не-циркадных экспериментов или сравнений между генотипами.