빠른 형광

면역 형광 (면역 FISH) 동일계 하이브리드 화 (FISH)에서 RNA 형광체를 결합 단백질, 후생 유전 학적 변형 및 다른 세부 사항들의 위치 파악에 동시 통찰력 RNA 현지화 공간적 동역학을 검출하는 단일 세포 수준에서 사용될 수있는 기술을 만들어 이는 면역에 의해 강조 할 수있다. X 염색체 불 활성화 긴 비 코딩 RNA (lncRNA) - 매개 유전자 침묵에 대한 패러다임이다. 포유류 암컷의 두 X-염색체 중 하나 (XIST 구름이라고도 함) X-비활성 특정 성적 증명서 (XIST) lncRNA 축적은 X 염색체 비활성화를 시작하는 중요한 단계입니다. XIST RNA를 직접 또는 간접적으로 다양한 염색질 수정 효소와 상호 작용 및 비활성 X 염색체 (사이)에 별개의 후생 유전 학적 풍경을 소개합니다. 사이의 하나 알려진 후생 유전 학적 특징은 히스톤 H3 트리메틸 라이신 27 (H3K27me3) 수정이다. 여기서 우리는 간단하고 빠른 면역 FISH를 설명XIST RNA의 현지화와 관련된 후성 유전 적 변형을 검사 H3K27me3의 면역과 함께 여러 올리고 뉴클레오티드 프로브 RNA FISH를 사용 XIST RNA를 검출하기위한 프로토콜입니다. 올리고 뉴클레오티드 프로브 짧은 배양 시간에 결과와 시험 관내 전사 RNA 프로브 (리보 프로브)에 비해 XIST RNA의 민감한 검출 기능의 사용. 이 프로토콜은 lncRNAs의 역학 및 관련 후성 ​​유전 학적 변형, 크로 마틴 구조, 핵 조직 및 전사 조절을 이해하기위한 강력한 도구를 제공합니다.