Investigando a função de Coronin A no Precoce fome resposta de

Dictyostelium discoideum ameba são encontrados no solo, alimentando-se de bactérias. Quando as fontes de alimentos se tornam escassos, eles secretam fatores para iniciar um programa de desenvolvimento multicelular, durante o qual células individuais chemotax para os centros de agregação ^1-4. Este processo é dependente da libertação de monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) ^5. O AMPc é produzido em ondas através da acção concertada de adenilato-ciclase e fosfodiesterase, e liga-se a receptores de G cAMP acoplados à proteína ^6,7. Um ensaio amplamente utilizado para analisar os mecanismos envolvidos no ciclo de desenvolvimento do Dictyostelium discoideum eucariota inferior é baseado na observação de agregação de células em condições submersas ^8,9. Este protocolo descreve a análise do papel de coronin A no ciclo de desenvolvimento pela inanição em placas de cultura de tecidos imersos em solução salina equilibrada (BSS) ^10. Coronin A é um membro da PR amplamente conservadaotein família de coronins que têm sido implicados numa grande variedade de actividades ^11,12. Dictyostelium células que carecem coronin A são incapazes de formar agregados multicelulares, e este defeito pode ser resgatado por fornecimento de impulsos de AMPc, o que sugere que coronin A actua a montante do cAMP cascata ^10. As técnicas descritas nestes estudos fornecem ferramentas robustas para investigar as funções das proteínas durante as fases iniciais do ciclo de desenvolvimento de Dictyostelium discoideum a montante da cascata do AMPc. Assim, a utilização deste ensaio de agregação pode permitir a um estudo mais aprofundado da coronin Uma função e fazer avançar nossa compreensão da biologia coronin.