Undersöker funktion Coronin A i tidig Svält svar av

Dictyostelium discoideum amöba finns i jord, livnär sig på bakterier. När matkällor blir knappa, de utsöndrar faktorer att inleda en flercellig utvecklingsprogram, under vilken enskilda celler chemotax mot aggregering centra ^1-4. Denna process är beroende på frisättningen av cykliskt adenosinmonofosfat (cAMP) ^5. cAMP produceras i vågor genom samordnade åtgärder av adenylatcyklas och fosfodiesteraser, och binder till G-proteinkopplade receptorer cAMP ^6,7. En allmänt använd analys för att analysera de mekanismer som är involverade i utvecklingscykeln för lägre eukaryot Dictyostelium discoideum baseras på observation av cell aggregation i submersa betingelser ^8,9. Detta protokoll beskriver analys av den roll coronin A i utvecklingscykeln av svält i vävnadsodlingsplattor nedsänkta i balanserad saltlösning (BSS) ^10. Coronin A är en medlem av den allmänt bevarade protein familj av coronins som har implicerats i ett stort antal olika aktiviteter ^11,12. Dictyostelium celler som saknar coronin A är oförmögna att bilda flercelliga aggregat, och denna defekt kan räddas genom att tillföra pulser av cAMP, vilket antyder att coronin A akter uppströms om cAMP kaskad ^10. De tekniker som beskrivs i dessa studier ger robusta verktyg för att undersöka funktioner av proteiner under de inledande skedena av utvecklingscykeln av Dictyostelium discoideum uppströms cAMP kaskad. Därför kan utnyttja denna aggregering analys tillåta ytterligare studier av coronin En funktion och förbättra vår förståelse av coronin biologi.