Abstract
Biology
Dictyostelium discoideum amiplerin beslenen toprak bulunur. Besin kaynakları kıt hale geldiğinde, tek hücre toplama merkezlerine 1-4 doğru chemotax sırasında bir çok hücreli geliştirme programını başlatmak için faktörleri salgılar. Bu işlem, siklik adenozin monofosfat (cAMP) 5 serbest bağlıdır. cAMP adenilat siklaz ve fosfodiesterazlarm birlikte hareket dalgasından üretilen ve G protein-eşli reseptör cAMP 6,7 ile bağlanır. Yaygın olarak kullanılan deney, daldırılmış koşullar 8,9 hücre toplanmasının gözlemine dayanır Alt düzey ökaryot Dictyostelium discoideum gelişimsel döngüsünde yer alan mekanizmaların analiz etmek. Bu protokol, dengelenmiş tuz çözeltisi (BSS) 10 içine daldırılmış doku kültürü plakaları içinde açlık gelişim döngüsünde Koronin A rolünün analizine açıklanmaktadır. Koronin bir yaygın korunmuş pr üyesidirfaaliyetleri 11,12 çeşitli suçlanmıştır coronins bir otein ailesi. A Koronin eksik Dictyostelium hücreleri çok hücreli agrega oluşturamamaktadırlar ve bu kusur düşündüren, cAMP bakliyat tedarik tarafından kurtarıldı olabilir üst baş eylemleri Koronin cAMP 10 basamakla. Bu çalışmalarda tarif edilen teknikler cAMP kaskadının yukan Dictyostelium discoideum gelişimsel döngüsünün ilk aşamalarında proteinlerin işlevleri araştırmak için güçlü araçlar sağlar. Bu nedenle, bu toplama tahlil kullanan bir fonksiyon Koronin ve daha fazla çalışma izin ve Koronin biyoloji anlayışımızı ilerleyebilir.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved