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Biology

격리, 문화 및 성인 마우스 심근 세포의 형질 도입

Published: August 28th, 2016

DOI:

10.3791/54012

1Cardiovascular Research Institute, University of California, San Francisco

배양 심근 세포는 생체 내 시스템 보완 기술을 이용하여 심근 생물학을 연구 할 수있다. 예를 들어, 체외 문화의 순도 및 접근성은 생화학 적 분석, 라이브 이미징 및 전기 생리학 미세하게 제어 할 수 있습니다. 심근의 장기 문화는 단기 문화에서 완료 할 수 없습니다 추​​가 실험 방법에 대한 액세스를 제공합니다. 예를 들어, 탈분화 세포주기에 재진입하고, 세포 분열의 생체 외 연구는 지금까지 대부분의 장기 배양에서 더욱 강력한 것으로 보인다 래트 심근 세포로 제한되었다. 그러나, 유전자 변형 마우스 라인과 잘 발달 된 질병 모델의 풍부한 툴 세트의 가용성은 심장 연구를위한 마우스 시스템이 매력. 여러 보고서가 성인 마우스 심근 분리의 존재하지만, 몇몇 연구들은 장기 문화를 보여줍니다. 여기에 제시된 상기 단계별 방법성인 마우스 심근 세포의 분리 및 장기 문화. 첫째, 역행을 Langendorff 관류 효율적으로 중력 침강 정제 다음 프로테아제와 마음을 소화하는 데 사용됩니다. 탈분화 다음 격리 기간 후에, 세포 배양에 서서히 부착 주 동안 배양 할 수있다. 아데노 바이러스 세포 용 해물을 효율적으로 단리 심근 세포를 형질 도입하기 위해 사용된다. 이러한 방법은 심근 생물학을 연구 할 수있는 간단하지만 강력한 모델 시스템을 제공한다.

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