एक कदम की नकारात्मक Chromatographic शोधन

हेलिकोबेक्टर न्यूट्रोफिल सक्रिय प्रोटीन (एचपी-एनएपी) हेलिकोबेक्टर (एच पाइलोरी) के एक प्रमुख विषैलापन कारक है। यह एच में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है पाइलोरी न्यूट्रोफिल, monocytes, और मस्तूल कोशिकाओं सहित कई जन्मजात ल्यूकोसाइट्स को सक्रिय करने से आमाशय सूजन प्रेरित। हिमाचल प्रदेश झपकी के immunogenic और इम्यूनोमॉड्यूलेटरी गुण यह एच के लिए एक संभावित निदान और टीका उम्मीदवार बनाना पाइलोरी और कैंसर के उपचार के लिए एक नई दवा उम्मीदवार। आदेश शुद्ध हिमाचल प्रदेश झपकी अपनी नैदानिक ​​अनुप्रयोगों के लिए इस्तेमाल की पर्याप्त मात्रा में प्राप्त करने के लिए, एक कारगर तरीका शुद्ध करने के लिए उच्च उपज और पवित्रता के साथ इस प्रोटीन की स्थापना की जानी चाहिए।

इस प्रोटोकॉल में, हम diethylaminoethyl (DEAE) आयन एक्सचेंज रेजिन का उपयोग करके पुनः संयोजक एचपी झपकी कोलाई (ई कोलाई) में overexpressed से एक कदम नकारात्मक chromatographic शुद्धि के लिए एक विधि का वर्णन किया है (जैसे।, Sephadex) मैंn बैच मोड। संयोजक एचपी झपकी ई में कुल प्रोटीन का लगभग 70% का गठन किया कोलाई और लगभग पूरी तरह से पीएच 9.0 पर सेल पर घुलनशील अंश में बरामद किया है। पीएच 8.0 पर इष्टतम स्थिति के अंतर्गत, हिमाचल प्रदेश झपकी के बहुमत अनबाउंड अंश में बरामद किया है, जबकि ई से अंतर्जात प्रोटीन कोलाई कुशलता राल से हटा रहे हैं।

DEAE आयन एक्सचेंज रेजिन के साथ नकारात्मक मोड बैच क्रोमैटोग्राफी का उपयोग इस शोधन विधि पैदावार ई से कार्यात्मक हिमाचल प्रदेश झपकी उच्च उपज और पवित्रता के साथ अपने मूल रूप में कोलाई। शुद्ध हिमाचल प्रदेश झपकी आगे की रोकथाम, इलाज के लिए उपयोग किया जा सकता है, और एच के रोग का निदान पाइलोरी रोगों के साथ ही कैंसर के उपचार -associated।