Abstract
Biology
De kracht van Drosophila genetica wordt steeds vaker toegepast bevat hormoon signalering en metabolisme en de ontwikkeling van modellen van menselijke ziekte in dit organisme. Gevoelige methoden voor metingen van parameters zoals stofwisseling nodig zijn begrip van de fysiologie en ziekte bij kleine dieren drijven zoals de fruitvlieg. De hier beschreven methode beoordeelt brandstof oxidatie in kleine aantallen volwassen vliegen gevoed levensmiddelen die sporen van 14 C-gelabelde substraten zoals glucose en vetzuren. Na de voertijd en eventuele aanvullende experimentele manipulaties zijn vliegen overgebracht in korte buizen afgedekt met gaas, dat vervolgens in glazen flesjes die KOH-verzadigde filterpapier die vallen uitgeademd worden geplaatst, radiolabeled CO 2 gegenereerd door oxidatie van radioactief gemerkte substraten kaliumbicarbonaat, KHCO3. Dit radiolabeled bicarbonaat wordt gemeten door scintillatietelling. Dit is aqKWANTITATIEVE, reproduceerbare en eenvoudige benadering voor de studie van de brandstof oxidatie. Het gebruik van radioactief gelabeld glucose, vetzuren of aminozuren maakt bepaling van de bijdrage van deze verschillende brandstoffen naar energiemetabolisme onder verschillende omstandigheden, zoals voeding en vasten en in verschillende genetische achtergronden. Dit vormt een aanvulling op andere benaderingen gebruikt om te meten in vivo energiemetabolisme en moet het begrijpen van metabole regulatie bevorderen.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved