Abstract
Developmental Biology
embriyonik vasküler endotel hemogenic endotel hücrelerinin özellikleri farklı dokulardaki kısa gelişim dönemlerinde oluşur ve (fare ekstra embriyonik yolk kesesi, plasenta, göbek damarları ve embriyonik aorta-gonad-mesonephros gelen kesin HSPC ortaya çıkması için gerekli olan AGM) bölgesi. Bu hücre popülasyonunun geçici doğası ve küçük boyutlu dikkatli ölçümü ve deneysel uygulamalar için tekrarlanabilir izolasyon teknik olarak zor hale getirir. Bu yumurta sarısının ve AGM bölgesindeki pik üretim zamanlarda hemogenic endotel hücreleri ve HSPC eşzamanlı izolasyonu için bir floresan-aktive edilmiş hücre sıralama (FACS) tabanlı protokol kurduk. Biz yolk kesesi ve fare embriyoları AGM dokuların diseksiyonu için yöntemler göstermek ve biz önce FACS yoluyla belirlenmesi ve alımı için maksimum hücrenin hayatta kalması için optimize doku sindirim ve antikor konjugasyon koşullarını sunuyoruz. Temsilcisi FACS analizis araziler bu hemogenic endotelyal hücre ve HSPC fenotipleri belirlemek ve klonal düzeyde kendi kan yapıcı potansiyelini değerlendirmek için bir metilselüloz bazlı analiz tanımlamak gösterilmiştir.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved