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Neuroscience

O nervo fibular método de lesão: um ensaio confiável para identificar e testar fatores que o reparo Junções Neuromusculares

Published: August 11th, 2016

DOI:

10.3791/54186

1Carilion Research Institute, Virginia Tech, 2Carilion School of Medicine, Virginia Tech, 3Department of Biological Sciences, Virginia Tech

A junção neuromuscular (MNJ) sofre alterações estruturais e funcionais deletérios, como resultado do envelhecimento, ferimentos e doenças. Assim, é imperativo compreender as alterações celulares e moleculares envolvidos na manutenção e reparação NMJs. Para esta finalidade, desenvolvemos um método fiável e consistente para examinar regenerar NMJs em ratinhos. Este método envolve a lesão do nervo esmagamento do nervo fibular comum, uma vez que passa por cima da cabeça lateral do tendão do músculo gastrocnêmio, perto do joelho. Usando ratos fêmeas mais velhas 70 dias, demonstramos que axônios motores começam a reinnervate metas pós-sinápticos anteriores no prazo de 7 dias após o esmagamento. Eles reocupar completamente suas áreas sinápticas anteriores por 12 dias. Para determinar a confiabilidade desse método de lesão, foram comparadas as taxas de reinervação entre camundongos fêmeas velhas 70 dias individuais. Verificou-se que o número de sítios pós-sinápticos reinervados foi semelhante entre os ratinhos em 7, 9, e 12 dias pós-esmagamento. Para determinar seeste ensaio de lesão também pode ser utilizado para comparar as alterações moleculares em músculos, que examinaram os níveis de gama-a subunidade do receptor nicotínico muscular (gama-AChR) e a quinase específica do músculo (almíscares). A subunidade gama-AChR e almíscar que são altamente regulada seguinte desnervação e retornar aos níveis normais após a reinervação dos NMJs. Encontramos uma relação estreita entre os níveis de transcrição para estes genes e status inervação dos músculos. Acreditamos que este método irá acelerar nossa compreensão das mudanças celulares e moleculares envolvidos na reparação do MNJ e outras sinapses.

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