एक लाइव zebrafish भ्रूण में mitotic डिवीजन और गतिशीलता अवलोकन

सूत्रीविभाजन जीवधारी विकास और भेदभाव के लिए महत्वपूर्ण है। प्रक्रिया अत्यधिक गतिशील है और एक छोटे से समय सीमा में उचित क्रोमेटिन संक्षेपण, microtubule-kinetochore लगाव, गुणसूत्र अलगाव, और cytokinesis को पूरा करने का आदेश दिया घटनाओं की आवश्यकता है। नाजुक प्रक्रिया में त्रुटियों जन्म दोष और कैंसर सहित मानव रोग, हो सकती है। पारंपरिक मानव mitotic रोग राज्यों की जांच के दृष्टिकोण अक्सर सेल संस्कृति प्रणाली है, जो प्राकृतिक शरीर विज्ञान और विकास / ऊतक विशेष लाभप्रद संदर्भ में जब मानव रोग का अध्ययन की कमी पर भरोसा करते हैं। इस प्रोटोकॉल उच्च संकल्प, एक कशेरुकी प्रणाली में गुणसूत्र गतिशीलता, zebrafish के साथ, कल्पना करने के लिए एक तरीका प्रदान करके कई बाधाओं पर काबू। इस प्रोटोकॉल एक दृष्टिकोण है कि कोशिकाओं को विभाजित, जिसमें शामिल की गतिशील छवियों को प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता विस्तार होगा: इन विट्रो प्रतिलेखन, zebrafish प्रजनन / इकट्ठा करने, भ्रूण एम्बेड, और समय चूक इमेजिंग। अनुकूलन और modifइस प्रोटोकॉल के ications भी पता लगाया है। H2A.F / Z-EGFP का प्रयोग और mCherry-CAAX (लेबल कोशिका झिल्ली) mRNA इंजेक्शन भ्रूण, एबी जंगली प्रकार, auroraB ^hi1045, और esco2 ^hi2865 उत्परिवर्ती zebrafish कल्पना है में बँटवारा (क्रोमेटिन लेबल)। zebrafish में उच्च संकल्प रहते इमेजिंग एक कई mitoses निरीक्षण करने के लिए सांख्यिकीय mitotic दोषों और mitotic प्रगति के समय यों की अनुमति देता है। इसके अलावा, गुणात्मक पहलुओं है कि अनुचित mitotic प्रक्रियाओं (यानी, congression दोष, गुणसूत्रों की missegregation, आदि) और अनुचित गुणसूत्र परिणामों (यानी, aneuploidy, polyploidy, micronuclei, आदि) को परिभाषित का अवलोकन मनाया जाता है। इस परख ऊतक भेदभाव / विकास का अवलोकन करने के लिए लागू किया जा सकता और उत्परिवर्ती zebrafish और औषधीय एजेंटों के उपयोग के लिए उत्तरदायी है। कैसे बँटवारा में दोष कैंसर और विकासात्मक विकारों के लिए काफी होगा नेतृत्व के दृश्यरोग के रोगजनन की समझ बढ़ाने के लिए।