En enkel Flowcytometriske metode for å måle glukoseopptak og Glukose Transporter Expression for Monocyttnivåene subpopulasjoner i fullblod

Monocytter er medfødte immunceller som kan aktiveres av patogener og betennelse forbundet med visse kroniske inflammatoriske sykdommer. Aktivering av monocytter induserer effektorfunksjoner og samtidig skifte fra oksidativ til glycolytic metabolisme som er ledsaget av økt glukosetransportør uttrykk. Denne økte glykolytisk metabolisme er også observert for trent immunitet av monocytter, en form for medfødt immunologisk hukommelse. Selv om in vitro-protokoller som undersøker glukosetransportør ekspresjon og glukoseopptak ved hjelp av monocytter er blitt beskrevet, har ingen vært undersøkt ved hjelp av multi-parametriske flowcytometri i fullblod. Vi beskriver en multiparametrisk flowcytometrisk protokoll for måling av fluorescerende glukoseanalogen 2-NBDG opptak i fullblod ved å totale monocytter og den klassiske (CD14 CD16 ^{++ -),} intermediat (CD14 ⁺⁺ CD16 ⁺⁾ og ikke-klassiske ( CD14 ⁺ CD16 ⁺⁺⁾ monocyttersubpopulasjoner. Denne fremgangsmåten kan brukes til å undersøke glukosetransportør ekspresjon og glukoseopptak for de totale monocytter og monocytt-subpopulasjoner i løpet av homeostase og inflammatorisk sykdom, og kan lett modifiseres for å undersøke glukoseopptak av andre leukocytter og leukocytt-subpopulasjoner i blod.