Abstract
Immunology and Infection
Monocyter är medfödda immunceller som kan aktiveras av patogener och inflammation i samband med vissa kroniska inflammatoriska sjukdomar. Aktivering av monocyter inducerar effektorfunktioner och en åtföljande övergång från oxidativ till glykolytiska metabolismen som är förenad med ökad glukostransportör uttryck. Denna ökade glykolytiska metabolismen observeras även för utbildad immunitet monocyter, en form av medfödd immunologiskt minne. Även in vitro protokoll undersöker glukostransportör uttryck och glukosupptag av monocyter har beskrivits, har ingen granskats av flera parametrisk flödescytometri i helblod. Vi beskriver en multi-parametrisk flödescytometrisk protokoll för mätning av fluorescerande glukos analog 2-NBDG upptag i helblod med totala monocyter och den klassiska (CD14 ++ CD16 -), mellan (CD14 ++ CD16 +) och icke-klassiska ( CD14 + CD16 ++) monocytsubpopulationer. Denna metod kan användas för att undersöka glukostransportör uttryck och glukosupptag för total monocyter och monocyt subpopulationer under homeostas och inflammatorisk sjukdom, och kan lätt modifieras för att undersöka glukosupptag för andra leukocyter och leukocyter subpopulationer inom blod.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved