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Genetics

体外转录测定及其在药物研究中的应用

Published: September 20th, 2016

DOI:

10.3791/54256

1School of Environmental and Life Sciences, University of Newcastle, 2Department of Applied Biology and Chemical Technology, The State Key Laboratory of Chirosciences, The Hong Kong Polytechnic University

体外转录测定法已被开发并广泛使用了许多年,以研究参与转录的分子机制。这个过程需要多亚基DNA依赖性RNA聚合酶(RNAP)等一系列的,其作用的基因表达过程中调节RNA聚合酶的活性转录因子。放射性成绩单的测序凝胶电泳用于提供关于如何转录所得,哪些参数可以影响它的详细机理信息。在本文中,我们描述了协议来研究必不可少延伸因子的NusA如何调控转录暂停,以及一个以确定抗菌剂通过抑制RNA聚合酶全酶形成指定转录起始方法。这些方法可用于一个作为平台的额外方法的发展探索转录因子的作用机制仍然不清楚,以及新的抗菌阿根TS靶向转录这是在抗生素研发的未充分利用的药物靶标。

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