HIV-1 Gag的可视化绑定到巨人的单片囊泡（GUV）膜

HIV-1的结构蛋白，PR55 ^的Gag（或加格），在病毒组装过程中结合到在细胞质膜。加格膜结合是病毒颗粒形成的一个重要步骤，因为在加格膜结合导致病毒颗粒生产严重受损的缺陷。获得的Gag-脂质膜相互作用的机理的细节，基于核磁共振，蛋白足迹，表面等离子体共振，脂质体浮选离心或荧光脂质珠体外方法结合迄今已开发的。然而，每一个的这些体外方法有其局限性。为了克服这些局限性，并提供一个互补的方式来先前建立的方法，我们开发了一种体外测定，其中HIV-1 Gag和脂质膜之间的相互作用发生在一个“细胞样”的环境。在该测定中，GAG结合到脂质膜在视觉上分析使用YFP - taggeð加格在小麦胚芽合成基于体外翻译系统，并通过electroformation技术制备GUVs。在这里，我们描述了背景和协议，以获得必要的测定肉豆蔻酰化全长的Gag蛋白和GUV膜和检测的Gag-GUV通过显微镜约束力。