Combinada Near-infrared imagens fluorescentes e tomografia Micro-computado para Diretamente Visualizando Cerebral tromboêmbolos

imaging trombo direta visualiza a causa raiz de infarto tromboembólica. Ser capaz de trombo imagem permite diretamente muito melhor investigação de acidente vascular cerebral do que depender de medições indiretas, e será uma ferramenta de pesquisa vascular potente e robusto. Nós usamos uma abordagem de imagem óptico que rotula trombos com um marcador trombo imagiologia molecular - um Cy5.5 fluorescente no infravermelho próximo (NIRF) sonda que está ligado de forma covalente às cadeias de fibrina do trombo pela acção enzimática-reticulação de fibrina de activado factor de coagulação XIII, durante o processo de maturação coágulo. Uma abordagem baseada tomografia computadorizada-micro (microCT) utiliza nanopartículas de ouro de procura de trombo (AuNPs) funcionalizados para atingir o principal componente do coágulo: fibrina. Este documento descreve um protocolo detalhado para o combinado in vivo microCT e ex vivo NIRF imagem de tromboembolismo em um rato modelo de acidente vascular cerebral embólico. Mostra-se que in vivo </ em> microCT e AuNPs glicol-quitosana-alvejado fibrina (FIB-GC-AuNPs) pode ser usado para visualizar tanto em trombos situ e trombos embolia cerebral. Nós também descrevem a utilização de imagiologia de trombos in vivo directa baseada microCT para monitorizar os efeitos terapêuticos em série de plasminogénio de tecido mediada por activador de trombólise. Após a última sessão de imagens, demonstramos por ex vivo NIRF imagem da extensão e a distribuição de tromboembolismo residual no cérebro. Finalmente, descrevemos imagem análises quantitativas de dados de imagem microCT e NIRF. A técnica de imagiologia de trombos combinado directa permite dois métodos independentes de visualização de trombo a ser comparados: a área de sinal fluorescente relacionadas com o trombo em ex vivo NIRF de imagem em relação ao volume de trombos hiperdenso microCT in vivo.