测量

三磷酸腺苷水解酶，或ATP酶，在细胞功能多样化阵列发挥关键作用。这些动态蛋白可用于机械工作，如蛋白质运输和退化，溶质运移和细胞运动产生能量。此处所描述的协议是用于测量纯化ATP酶的体外活性功能表征一个基本化验。蛋白水解的ATP以导致的无机磷酸盐的释放反应，和磷酸盐的释放的量，然后用比色测定法进行定量。这个高度适应协议可以进行调整，以测量在动力学或终点测定ATP酶活性。代表性的协议是基于活性和EPSE要求这里提供时，AAA + ATP酶参与II型分泌在细菌霍乱弧菌 。测量活动所需的纯化的蛋白质的量，测定的长度和sa定时和数量mpling间隔，缓冲液和盐的组合物，温度，辅因子，兴奋剂（如果有的话） 等可以从这里描述的变化，并且因此一些优化可能是必要的。该协议为特征的ATP酶的基本框架，并可以快速进行，方便地根据需要进行调整。