Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

我们描述了一个快速,分子为基础的甲型和乙型流感检测。流感检测采用等温扩增与流感特异性引物,其次是目标检测与分子信标探针检测15分钟内每一个目标。的甲型和乙型流感检测是用户友好的,并要求最少的动手时间来执行。

Abstract

流感是在人中由流感病毒引起A和B的传染性呼吸系统疾病,并导致每年发病率和死亡率的一个显著量。的甲型和乙型流感检测是第一个可用的CLIA-放弃分子快速流感测试。流感A和B的测试工作通过采用等温扩增与流感特异性引物,接着目标检测的分子信标探针。这里,A型流感的性能和B测定冷冻,归档鼻咽拭子(NPS)试样储存在病毒运输介质(VTM)进行比较,以呼吸面板测定。

流感A和B测定的性能通过的结果相比较,以呼吸面板参考方法进行评价。总甲型流感病毒的敏感性为67.5%(95%CI(CI),56.6-78.5),特异性为86.9%(CI,71.0-100)。对于乙型流感病毒的检测,其敏感性和特异性分别为90.2%(CI,68.5-100)和98.8%(CI,68.5-100)表示。

该系统具有的显著缩短测试时间比其他任何现有的分子检测及简单,无吸管程序运行的优势一个完全集成的,封闭的,小尺寸的系统。总体而言,流行性感冒A和B测定本研究评估具有作为一个点 - - 关心快速流感诊断测试的可能性。

Introduction

流感病毒感染导致发病率和死亡率,每年1,2,3的显著量。单纯性流感的特点是宪法和呼吸道症状,如发热,肌痛,头痛和非生产性咳嗽4,5。老年人,幼儿,免疫功能低下患者,和患者的潜在合并症处于严重的并发症,如肺炎,心肌炎,中枢神经系统疾病,甚至导致死亡6,7风险较高。

流感感染是抗病毒治疗的症状出现后48小时内及时服用能减少疾病的严重程度和长度从8其他呼吸道病毒唯一的。流感的快速鉴定也已示出减少使用的不必要的抗生素9,10。另外,住院患者感染流感病毒必须放置在适当的感染控制预防措施隔离室。然而,所造成的非流感病毒呼吸道疾病可能难以从流感临床区分。出于这个原因,对于流感快速准确的诊断测试是用于临床患者管理非常重要。

数测定法可用于检测和流感病毒鉴定。....

Protocol

道德守则:使用遗留临床标本被批准,并遵循纪念斯隆 - 凯特琳癌症中心伦理审查委员会的指导方针。

1.在运行分析

注:甲型和乙型流感检测已被批准用于鼻咽拭子标本和存储在病毒的传输介质鼻咽拭子。拭子被包括在试剂盒中,并应被用于最佳性能。然而,人造丝,泡沫,植绒拭子或聚酯鼻拭子也可用于收集鼻拭子样品。

  1. 收集鼻拭子样本,将拭子插入具有最明显的排水或者?.......

Representative Results

在这项研究中,归档NPS标本采自2013年NPS标本在3毫升住院患者提交2012年12月15日和3月1日之间的流感爆发期间与纪念斯隆 - 凯特琳癌症中心(MSKCC)流感样症状的收集VTM,并与检测呼吸道病毒(RP),其中包括流行性感冒A,A-1,A-3,和B小组在研究期间的分子检测常规的临床实践的一部分进行测试,3675 ​​NPS标本提交到MSKCC临床实验室进行检测。这些标本,45,425,37,77的药.......

Discussion

流感病毒是发病率和死亡率的显著世界范围的原因。流感的快速和准确的诊断是主要键期间呼吸季节管理流感爆发中的一个。其他基于抗原的测试是快速和容易执行;然而,它们具有低的灵敏度13。另一方面,传统的分子测试具有改善的敏感性,但需要更多的有经验的化验师来执行,而且更昂贵。在这项研究中和协议中描述的流感A和B测定是流感A和B的CLIA-放弃,快速的分子测试的?.......

Acknowledgements

We thank the Clinical Microbiology Service staff of the Memorial Sloan-Kettering Cancer Center for help in collecting clinical specimens. This study was supported in part by a research agreement between MSKCC and Alere Scarborough (SK2013-0262).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Alere i InstrumentAlereNAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test KitAlere425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode ScannerAlereEQ001001
Alere Universal PrinterAlere55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport mediumRemelM4-RT

References

  1. . . Prevention control of seasonal influenza with vaccines. Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices--United States, 2013-2014. , 1-43 (2013).
  2. Poehling, K. A., et al. The Underrecognized Burden of Influenza in Young Children. New England J....

Explore More Articles

119

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved