Rapid Détection moléculaire et différenciation des virus grippaux A et B

Summary

Nous décrivons un essai rapide, à base moléculaire de la grippe A et B. L'essai détecte la grippe chaque cible dans les 15 minutes en utilisant une amplification isotherme avec des amorces spécifiques de la grippe suivie par la détection de cibles avec des sondes de balises moléculaires. Le dosage et la grippe A B est convivial et nécessaire minimes mains sur le temps d'effectuer.

Abstract

La grippe est une maladie respiratoire contagieuse provoquée par un virus de la grippe A et B chez l'homme et provoque une quantité importante de morbidité et de mortalité chaque année. La grippe A et le dosage de B a été le premier test de la grippe moléculaire rapide CLIA renoncé disponible. Le test de la grippe A et B fonctionne en utilisant une amplification isotherme avec des amorces spécifiques de la grippe suivie par la détection de cibles avec des sondes de balises moléculaires. Ici, la performance de la grippe A et le dosage de B sur congelés, archivés écouvillon nasopharyngé (NPS) spécimens stockés dans un milieu de transport viral (VTM) ont été comparés à un test de panel respiratoire.

La performance de l'essai A et B de la grippe a été évaluée en comparant les résultats de la méthode de référence du panneau respiratoire. La sensibilité pour le virus de la grippe A totale était de 67,5% (IC à 95% (CI), de 56,6 à 78,5) et la spécificité était de 86,9% (IC, 71,0 à 100). Pour les tests de virus de la grippe B, la sensibilité et la spécificité étaient de 90,2% (IC, 68,5 à 100) Et 98,8% (IC à 68,5 à 100), respectivement.

Ce système a l'avantage d'un temps d'essai significativement plus courte que tout autre test moléculaire actuellement disponibles et la procédure simple et sans pipette fonctionne sur un système entièrement intégré, fermé, à faible encombrement. Dans l'ensemble, la grippe A et le dosage de B évalué dans cette étude a le potentiel de servir de test de diagnostic rapide influenza point de soins.

Introduction

Les infections virales de la grippe se traduisent par une quantité importante de morbidité et de mortalité chaque année ^{1, 2, 3.} La grippe Uncomplicated est caractérisée par des symptômes constitutionnels et respiratoires tels que la fièvre, des myalgies, des céphalées et une toux non productive ^{4, 5.} Les personnes âgées, les jeunes enfants, les patients immunodéprimés et les patients atteints de comorbidités sous - jacentes sont à un risque plus élevé de complications graves telles que la pneumonie, la myocardite, u....

Protocol

ÉTHIQUE ÉTAT: L'utilisation de la gauche sur des échantillons cliniques est approuvé et suit les lignes directrices de l'Institutional Review Board Cancer Center Memorial Sloan Kettering.

1. Avant de lancer le test

NOTE: La grippe A et le test B est approuvé pour les spécimens d'écouvillons nasopharyngés et prélèvements nasopharyngés stockés dans les supports de transport viral. Les écouvillons sont inclus dans le kit et doivent être utilisées pour des performances optimales. Cep.......

Discussion

Les virus grippaux sont des causes importantes à l'échelle mondiale de morbidité et de mortalité. Un diagnostic rapide et précis de la grippe est l'une des principales clés de la gestion des éclosions de grippe pendant la saison respiratoire. D'autres tests basés sur l'antigène sont rapides et faciles à réaliser; cependant, ils ont une faible sensibilité ^13. D'autre part, les tests moléculaires traditionnels ont amélioré la sensibilité, mais exigent des technol.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport medium	Remel	M4-RT