Rapid Molecular Detection og Differensiering av influensavirus A og B

Summary

Vi beskriver en hurtig, molekylær-baserte Influensa A og B assay. Den Influensa analysen registrerer hvert mål innen 15 min ved å ansette isotermisk forsterkning med influensaspesifikke primere etterfulgt av mål deteksjon med molekylære beacon sonder. Den Influensa A og B-analysen er brukervennlig og krevde minimal hands-on tid til å utføre.

Abstract

Influensa er en smittsom luftveissykdom forårsaket av influensavirus A og B hos mennesker og forårsaker en betydelig mengde av sykelighet og dødelighet hvert år. Den Influensa A og B-analysen var den første CLIA-fravikes molekylær rask influensa test tilgjengelig. Den Influensa A og B-test fungerer ved å ansette isotermisk forsterkning med influensaspesifikke primere etterfulgt av mål deteksjon med molekylære beacon sonder. Her utførelsen av influensa A og B-analyse på frossen, arkivert nasofaryngeal pinne (NPS) eksemplarer lagret i virustransportmedium (VTM) ble sammenlignet med en luftveis analysen panel.

Utførelsen av influensa A og B assay ble evaluert ved å sammenligne resultatene for luft panel referansemetoden. Følsomheten for total influensavirus A var 67,5% (95% KI (CI), 56,6 til 78,5) og spesifisiteten var 86,9% (CI, 71,0 til 100). For influensavirus B-testing, sensitivitet og spesifisitet var 90,2% (CI, 68,5 til 100) Og 98,8% (CI, 68,5 til 100), henholdsvis.

Dette systemet har fordelen av en vesentlig kortere tid enn test enhver annen for tiden tilgjengelig molekylær analyse og den enkle, pipette-fri fremgangsmåte kjører på en fullt integrert, lukket, liten plass system. Totalt sett er influensa A og B assay undersøkt i denne undersøkelsen har potensiale til å tjene som et point-of-care hurtig influensa diagnostisk test.

Introduction

Influensa virus infeksjoner resultere i en betydelig mengde av sykelighet og dødelighet hvert år ^{1, 2, 3.} Ukomplisert influensa er preget av konstitusjonelle og luftveissymptomer som feber, myalgi, hodepine, og ikke-produktiv hoste ^{4, 5.} Eldre personer, små barn, immunsupprimerte pasienter og pasienter med underliggende komorbiditet er på et høyere risiko for alvorlige komplikasjoner som lungebetennelse, myokarditt, sentralnervesystemet sykdom eller død ^{seks, syv.<....}

Protocol

ETIKK UTTALELSE: Bruken av venstre-over kliniske prøver er godkjent og følger retningslinjene for Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review Board.

1. Før Kjøre analysen

MERK: Influensa A og B-analysen er godkjent for nasofaryngeale penselprøver og for nasofaryngeale kompresser som er lagret i virustransportmedium. Vattpinner er inkludert i settet og bør brukes for optimal ytelse. Imidlertid, rayon, skum, strømmet spinner eller polyester neseutstryk kan også brukes til å samle inn.......

Discussion

Influensavirus er betydelige globale årsaker til sykelighet og dødelighet. Rask og nøyaktig diagnose av influensa er en av de viktigste nøklene til styring av influensa respiratorisk utbrudd i løpet av sesongen. Andre antigen-baserte tester er rask og enkel å utføre; men de har lav følsomhet ^13. På den annen side har tradisjonelle molekylære tester forbedret følsomhet, men krever mer erfarne laboratorie teknologer å utføre, og er mer kostbare. Den Influensa A og B analysen beskrevet .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport medium	Remel	M4-RT