Snabb molekylär detektion och differentiering av influensavirus A och B

Summary

Vi beskriver ett snabbt, molekylbaserade Influensa A och B-analysen. Influensa analys detekterar varje mål inom 15 minuter genom att använda isotermisk förstärkning med influensaspecifika primers följt av ekopresentation med molekylära beacon-prober. Influensa A och B-analysen är användarvänligt och kräver minimal praktisk tid att utföra.

Abstract

Influensa är en smittsam respiratorisk sjukdom orsakad av influensavirus A och B hos människor och orsakar en betydande mängd av sjuklighet och dödlighet för varje år. Influensa A och B-analysen var den första CLIA-frångås molekyl snabba influensatest tillgängligt. Influensa A och B-test fungerar genom att använda isotermisk förstärkning med influensaspecifika primers följt av ekopresentation med molekylära beacon-prober. Här, utförandet av influensa A och B-analys på frusen, arkiveras nasofarynxpinne (NPS) prover lagras i virustransportmedium (VTM) jämfördes med en andnings panel analys.

Utförandet av influensa A och B-analysen utvärderades genom att jämföra resultaten för andningspanelen referensmetoden. Känsligheten för total influensavirus A var 67,5% (95% CI (CI), 56,6-78,5) och specificiteten var 86,9% (CI, 71,0-100). För influensavirus B-testning, känsligheten och specificiteten var 90,2% (CI, 68,5-100) Och 98,8% (CI, 68,5-100), respektive.

Detta system har fördelen av en betydligt kortare testtid än någon annan tillgänglig molekylär analys och enkel, pipett fritt förfarande körs på en helt integrerad, stängd, små fotavtryck systemet. Sammantaget influensa A och B-analysen utvärderades i denna studie har potential att fungera som en point-of-care snabb influensa diagnostiskt test.

Introduction

Influensavirusinfektioner resultera i en betydande mängd morbiditet och mortalitet varje år ^{ett, två, tre.} Okomplicerad influensa kännetecknas av konstitutionella och luftvägssymtom som feber, myalgi, huvudvärk, och icke-produktiv hosta ^{fyra, fem.} Äldre personer, barn, patienter med nedsatt immunförsvar och patienter med underliggande sjukdomstillstånd löper större risk för allvarliga komplikationer såsom lunginflammation, myokardit, centrala nervsystemet sjukdom eller död ^6,

Protocol

ETIK ANALYS: Användningen av överblivna kliniska prover är godkänd och följer riktlinjerna i Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review Board.

1. innan du kör analys

OBS: Influensa A och B-analysen är godkänd för nasofaryngeala pinnprover och för nasofarynxpinnar lagras i virustransportmedia. Kompresser ingår i satsen och bör användas för optimal prestanda. Emellertid, rayon, skum, flockade bomullstoppar eller polyesternasalprovtagningspinnar kan också användas för att sam.......

Discussion

Influensavirus är betydande globala orsaker till sjuklighet och dödlighet. Snabb och korrekt diagnos av influensa är en av de viktigaste nycklarna till att hantera influensautbrott under andnings säsong. Andra antigenbaserade tester är snabba och lätta att utföra; Men, de har låga känsligheter ^13. Å andra sidan har de traditionella molecular test förbättrad känslighet, men kräver mer erfarna laboratorie tekniker att utföra och är dyrare. Influensa A och B-analys som beskrivs i den.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport medium	Remel	M4-RT