Hurtig Molekylær Detection og Differentiering af Influenza Virus A og B

Summary

Vi beskriver en hurtig, molekylær-baserede Influenza A og B-assay. Den Influenza-analysen registrerer hvert mål inden for 15 minutter ved at ansætte isoterm forstærkning med influenza-specifikke primere efterfulgt af måldetektering med molekylære beaconprober. Den Influenza A og B-analysen er brugervenlig og krævede minimale hands-on tid til at udføre.

Abstract

Influenza er en smitsom luftvejssygdom forårsaget af influenzavirus A og B hos mennesker og forårsager en betydelig mængde af sygelighed og dødelighed hvert år. Influenza A og B assay var den første CLIA-frafaldes molekylær hurtige influenza test til rådighed. Den Influenza A og B-test virker ved at ansætte isoterm forstærkning med influenza-specifikke primere efterfulgt af måldetektering med molekylære beaconprober. Her, udførelsen af ​​influenza A og B assay på frosne, arkiverede nasopharyngeal podepind (NPS) prøver opbevaret i viral transportmedium (VTM) blev sammenlignet med en respiratorisk panel assay.

Udførelsen af ​​Influenza A og B-assay blev evalueret ved sammenligning af resultaterne for luftvejene panel referencemetoden. Følsomheden for total influenzavirus A var 67,5% (95% CI (CI), 56,6-78,5), og specificiteten var 86,9% (CI, 71,0-100). For influenzavirus B-test, sensitivitet og specificitet var 90,2% (CI, 68,5-100) Og 98,8% (CI, 68,5-100), hhv.

Dette system har den fordel, at en væsentlig kortere test tid end nogen anden i øjeblikket tilgængelige molekylære assay og den enkle, pipette-free procedure kører på en fuldt integreret, lukkede, små-fodaftryk system. Samlet, influenza A og B-assay evalueret i denne undersøgelse har potentiale til at tjene som en point-of-care hurtige influenza diagnostisk test.

Introduction

Influenzavirusinfektioner resultere i en betydelig mængde af sygelighed og dødelighed hvert år ^{1, 2, 3.} Ukompliceret influenza er præget af forfatningsmæssige og respiratoriske symptomer som feber, muskelsmerter, hovedpine, og ikke-produktiv hoste ^{4, 5.} Ældre individer, unge børn, immunsvækkede patienter og patienter med underliggende co-morbiditet er på et højere risiko for alvorlige komplikationer som lungebetændelse, myocarditis, sygdom i centralnervesystemet, eller død ^6,

Protocol

ETIK ERKLÆRING: Brugen af ​​venstre-over kliniske prøver er godkendt og følger retningslinjerne fra Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review Board.

1. Før Kørsel af Assay

BEMÆRK: Influenza A og B-analysen er godkendt til nasopharyngeale podninger og nasopharyngeale podninger gemt i virustransportmediet. Svaberprøver er inkluderet i sættet og bør anvendes til optimal ydeevne. Men rayon, skum, strømmede, podninger eller polyester næseskrab kan også anvendes til at indsamle .......

Discussion

Influenzavirus er betydelige verdensomspændende årsager til sygelighed og dødelighed. Hurtig og nøjagtig diagnose af influenza er en af ​​de vigtigste nøgler til at styre influenza udbrud i løbet af respiratorisk sæson. Andre antigen-baserede tests er hurtige og lette at udføre; men de har lave følsomheder ^13. På den anden side har de traditionelle molekylære test forbedret følsomhed, men kræver mere erfarne laboratorie teknologer at udføre og er dyrere. Influenza A og B-assay b.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport medium	Remel	M4-RT