Snelle Moleculaire detectie en differentiatie influenzavirussen A en B

Summary

We beschrijven een snelle, moleculair-gebaseerde Influenza A en B assay. De Influenza test detecteert elk doel binnen 15 minuten door het gebruik van isotherme amplificatie met influenza-specifieke primers, gevolgd door detectie van targets met moleculaire beacon sondes. De Influenza A en B test is gebruiksvriendelijk en vereist een minimale hands-on tijd om te presteren.

Abstract

Is een besmettelijke ziekte van de luchtwegen veroorzaakt door influenzavirussen A en B bij mensen en veroorzaakt een aanzienlijke hoeveelheid van morbiditeit en mortaliteit jaarlijks. De Influenza A en B-test was de eerste-CLIA afgezien moleculaire snelle grieptest beschikbaar. Het Influenza A en B test werkt door toepassing van isotherme amplificatie met influenza-specifieke primers gevolgd door target detectie met moleculaire beacon probes. Hier zijn de prestaties van het Influenza A en B assay op bevroren, gearchiveerd nasofaryngeaal uitstrijkje (NPS) specimens opgeslagen viraal transportmedium (VTM) werden vergeleken met een respiratoire panel-assay.

De prestatie van het Influenza A en B test werd geëvalueerd door de resultaten van de luchtwegen referentiepanel methode. De gevoeligheid voor de totale influenzavirus A was 67,5% (95% CI (CI), 56,6-78,5) en de specificiteit was 86,9% (CI, 71,0-100). Voor influenzavirus B-testen, de gevoeligheid en specificiteit was 90,2% (CI, 68,5-100) En 98,8% (CI, 68,5-100), respectievelijk.

Dit heeft het voordeel van een aanzienlijk kortere testtijd dan enige andere momenteel beschikbare moleculaire assay en eenvoudige, pipet-vrije procedure uitgevoerd op een volledig geïntegreerde gesloten, kleine footprint systeem. Kortom, het Influenza A en B assay geëvalueerd in dit onderzoek heeft het potentieel om te dienen als een point-of-care influenza snelle diagnostische test.

Introduction

Influenzavirusinfecties resulteren in een significante hoeveelheid van morbiditeit en mortaliteit jaarlijks ^{1, 2, 3.} Ongecompliceerde influenza wordt gekenmerkt door constitutionele en respiratoire symptomen zoals koorts, myalgie, hoofdpijn en niet-productieve hoest ^{4, 5.} Oudere mensen, jonge kinderen, immuungecompromitteerde patiënten en patiënten met onderliggende comorbiditeit zijn op een hoger risico op ernstige complicaties zoals longontsteking, myocarditis, het centrale zenuwstelsel en vaatziekten, of de dood <....

Protocol

ETHIEK VERKLARING: Het gebruik van de linker-over klinische monsters wordt goedgekeurd en volgt de richtlijnen van het Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Institutional Review Board.

1. voordat u de Assay

Opmerking: Het Influenza A en B test is goedgekeurd voor nasofaryngeale uitstrijkjes en nasofaryngeale uitstrijkjes opgeslagen in virustransportmedia. Doekjes in de kit en moet worden gebruikt voor optimale prestaties. Echter, rayon, schuim, stroomden wattenstaafjes of polyester neusswabs kan ook worde.......

Discussion

Influenzavirussen significante wereldwijd oorzaken van morbiditeit en mortaliteit. Snelle en nauwkeurige diagnose van influenza is een van de belangrijkste sleutels te beheren griep uitbraken tijdens respiratoire seizoen. Andere antigeen gebaseerde tests zijn snel en eenvoudig uit te voeren; echter zij lage gevoeligheden ^13. Anderzijds hebben traditionele moleculaire tests verbeterde gevoeligheid, maar vereisen meer ervaren laboratoriumtechnologen te voeren en duurder. Het Influenza A en B assay .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport medium	Remel	M4-RT