インフルエンザウイルスAおよびBの急速な分子の検出と分化

Summary

我々は、迅速な分子ベースのインフルエンザAおよびBアッセイを説明します。インフルエンザアッセイは分子ビーコンプローブで標的検出したインフルエンザ特異的プライマーを用いて等温増幅を用いることにより、15分以内に各ターゲットを検出します。インフルエンザAおよびBアッセイは、ユーザーフレンドリーで、実行するために最小限のハンズオン時間を必要としました。

Abstract

インフルエンザはヒトにおけるインフルエンザウイルスAおよびBに起因する伝染性の呼吸器疾患であり、毎年の罹患率および死亡率の有意な量を生じさせます。インフルエンザAおよびBアッセイは、最初CLIA-放棄分子の迅速なインフルエンザ検査が利用可能でした。インフルエンザAおよびBテストでは、分子ビーコンプローブを使用してターゲット検出したインフルエンザ特異的プライマーを用いて等温増幅を使用することによって動作します。ここでは、凍結した上でインフルエンザAの性能およびBアッセイは、呼吸器パネルアッセイと比較した試験片のウイルス輸送培地（VTM）に格納された鼻咽頭スワブ（NPS）をアーカイブしました。

インフルエンザAおよびBアッセイの性能は、呼吸パネル基準方法の結果を比較することによって評価しました。総インフルエンザウイルスAのための感度は67.5パーセント（95％CI（CI）、56.6から78.5）だった、特異度は86.9パーセント（CI、71.0から100）でした。インフルエンザウイルスBテストの場合は、感度と特異度は90.2パーセントであった（CI、68.5から100）と、それぞれ98.8パーセント（CI、68.5から100）、。

このシステムは、完全に統合された、閉じた、小さなフットプリントシステム上で実行される任意の他の現在利用可能な分子アッセイと、単純な、ピペット無手順よりも大幅に短い試験時間の利点を有しています。全体として、本研究で評価インフルエンザAおよびBアッセイは、ポイントオブケア迅速インフルエンザ診断検査として機能する可能性を有します。

Introduction

インフルエンザウイルス感染症は、罹患率および死亡率は毎年^1、2、3の有意な量を生じさせます。合併症のないインフルエンザは、発熱、筋肉痛、頭痛、および非生産的な咳^4、5として憲法と呼吸器症状によって特徴付けられます。高齢者、幼児、免疫不全患者、および基礎となる併存疾患を持つ患者は、肺炎、心筋炎、中枢神経系疾患、または死亡^6、7などの重篤な合併症のリスクが高いです。

インフルエンザ感染は、疾患の重症度と長さ^8を減らすことができ、症状の発症の48時間以内に抗ウイルス療法の迅速な投与の他の呼吸器ウイルスからユニークです。インフルエンザの迅速な同定もされています不必要な抗生物質^9、10の使用を低減することが示さ。また、インフルエンザ感染症の入院患者は、適切な感染制御予防策と孤立した部屋に配置する必要がありま....

Protocol

倫理声明：左オーバー臨床検体の使用が承認され、メモリアル・スローンケタリングがんセンター施設内倫理委員会のガイドラインに準拠しています。

1.アッセイを実行する前に、

注：インフルエンザAおよびBアッセイは、鼻咽頭スワブ検体のためおよびウイルス輸送媒体に格納された鼻咽頭スワブのために承認されています。スワブは、キットに含まれており、最適なパフォーマ.......

Discussion

インフルエンザウイルスは、罹患率および死亡率の重要な世界的な原因です。インフルエンザの迅速かつ正確な診断は、呼吸シーズン中にインフルエンザの大流行を管理するための主要な鍵の一つです。他の抗原ベースのテストでは、迅速かつ実行するのは簡単です。しかしながら、それらは、低い感度^13を有しています。一方、伝統的な分子検査は感度を改善したが、実?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), alereiprinter (US)
200 µL precision pipette
200 µL disposable pipette tips
Viral transport medium	Remel	M4-RT