CUBIC protokoll Visualiserar proteinuttryck på Single Cell Beslut hela montera hudpreparat

Huden är avgörande för vår överlevnad. Det yttre epidermal lagret består av interfollikulära epidermis, vilket är ett stratifierat skivepitel som täcker större delen av vår kropp, och epidermala bihang såsom hårsäckar och svettkörtlar. Epidermis genomgår regenerering under hela livet och som svar på skada. Detta möjliggörs av K14-uttryck basala epidermala stamceller / progenitorceller populationer som tätt regleras av flera regleringsmekanismer verksamma inom epidermis och mellan epidermis och dermis. Den här artikeln beskriver en enkel metod för att klargöra hela tjocklek mus hudbiopsier och visualisera K14 proteinuttrycksmönster, Ki67 märkt förökande celler, Nile Red märkta sebocyter och DAPI nukleära märkning på en enda cell upplösning i 3D. Denna metod möjliggör noggrann bedömning och kvantifiering av hud anatomi och patologi och onormala epidermal fenotyper i genetiskt modifierade möss linjer. Den kubiska protokollet är the bästa metoden tillgänglig hittills för att undersöka molekylära och cellulära interaktioner i full tjocklek hudbiopsier vid en enda cell upplösning.