تنفيذ نظام العدوى أساس إدراج-نافذ غشاء لدراسة آثار يفرز البكتيرية السموم على خلايا المضيف الثدييات

العديد من مسببات الأمراض البكتيرية تفرز السموم قوية للمساعدة في تدمير الأنسجة المضيف، لبدء التغييرات يشير في الخلايا المضيفة أو التلاعب استجابات جهاز المناعة خلال العدوى. على الرغم من أساليب وضعت لتنقية بنجاح وإنتاج العديد من هذه العوامل الفوعة مهمة، لا تزال هناك العديد من السموم البكتيرية التي بنية فريدة من نوعها أو تعديلات واسعة النطاق بعد متعدية جعل من الصعب تنقية ودراسة في نظم في المختبر. وعلاوة على ذلك، حتى عندما يمكن الحصول على السم النقي، وهناك العديد من التحديات المرتبطة بدراسة آثار محددة من السم في ظل الظروف الفسيولوجية ذات الصلة. الأكثر في نماذج زراعة الخلايا في المختبر يهدف إلى تقييم آثار السموم البكتيرية يفرز في الخلايا المضيفة تنطوي على احتضان الخلايا المضيفة مع جرعة لمرة واحدة من السم. هذه الأساليب سيئة تقارب ما الخلايا المضيفة في الواقع تجربة أثناء وجود عدوى، حيث يتم إنتاج السم باستمرار من قبلالخلايا البكتيرية والسماح لتتراكم تدريجيا خلال العدوى. يصف هذا البروتوكول تصميم نظام عدوى بكتيرية أساس إدراج-نفاذية الغشاء لدراسة آثار ستربتوليزين S، مادة سامة قوية تنتجها المجموعة العقدية، على القرنية الطلائية الإنسان. هذا النظام تحاكي بشكل وثيق البيئة الفسيولوجية الطبيعية خلال العدوى من الطرق حيث السم النقي أو supernatants البكتيرية يتم تطبيقها مباشرة إلى الخلايا المضيفة. الأهم من ذلك، كما يلغي هذا الأسلوب التحيز الردود المضيف الذي من المقرر أن الاتصال المباشر بين البكتيريا والخلايا المضيفة. وقد استخدم هذا النظام لتقييم فعالية آثار ستربتوليزين S (SLS) على المضيف سلامة الغشاء، والسلامة الخلوية، والاستجابات يشير الخلوية. هذه التقنية يمكن تطبيقها بسهولة لدراسة عوامل الفوعة أخرى يفرزها على مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا المضيفة الثدييات للتحقيق في دور معين من البكتيريا تفرز عامل دأورينغ مسار العدوى.