Réalisé Conditionnement des protéines dans la membrane externe de vésicules

Un intérêt croissant pour l'application des techniques de biologie synthétique pour programmer des vésicules de la membrane externe (OMV) conduisent à des applications très intéressantes et uniques pour OMV où nanoparticules traditionnelles se révèlent trop difficiles à synthétiser. A ce jour, toutes les bactéries à Gram négatif ont été montrés pour produire OMV démontrant l'emballage d'une variété de marchandises qui comprend des petites molécules, des peptides, des protéines et du matériel génétique. Sur la base de leur cargaison diverse, OMV sont impliqués dans de nombreux processus biologiques allant de la communication cellulaire pour le transfert de gènes et la fourniture de facteurs de virulence en fonction de laquelle les bactéries produisent le OMV. ont seulement récemment OMV bactérienne devenue accessible pour une utilisation dans un large éventail d'applications à travers le développement des techniques de contrôle et de conditionnement direct de protéines recombinantes dans OMV. Ce protocole décrit un procédé pour la production, la purification et l'utilisation de l'enzyme conditionnée OMV permettant une meilleure overaproduction ll d'enzyme recombinante, une augmentation de vésiculation, et amélioré la stabilité de l'enzyme. l'utilisation réussie de ce protocole va entraîner la création d'une souche bactérienne qui produit simultanément une protéine recombinante et la dirige pour l'encapsulation d'OMV en créant une liaison entre la protéine synthétique et d'une protéine recombinante d'ancrage de la membrane externe. Ce protocole détaille également les méthodes pour isoler OMV à partir de cultures bactériennes ainsi que des techniques de manipulation appropriées et des choses à considérer lors de l'adaptation de ce protocole d'utilisation pour d'autres applications uniques telles que: la livraison de médicaments pharmaceutiques, les diagnostics médicaux, et à l'assainissement de l'environnement.