Ploidiundersøkelse Manipulering av Sebrafisk embryoer med Heat Shock 2 Treatment

Manipulering av ploidiresultat tillater nyttige transformasjoner, som diploider til tetraploids eller haploids til diploider. I sebrafisk Danio rerio, spesielt generering av homozygote gynogenetic diploider er nyttig i genetisk analyse, fordi den tillater direkte produksjon av homozygote fra en enkelt heterozygot mor. Denne artikkelen beskriver en modifisert protokoll for ploiditet duplisering basert på en varmepuls i løpet av den første cellesyklus, Heat Shock 2 (HS2). Gjennom hemming av centriole duplisering, resulterer denne fremgangsmåte i en nøyaktig celledeling stall i løpet av den andre cellesyklus. Den nøyaktige en syklus divisjon stall, koblet til upåvirket DNA-kopiering, resulterer i hele genomet duplisering. Protokollene som er forbundet med denne metoden inkluderer egg og sperm samling, UV-behandling av sæd in vitro fertilisering og varmepuls for å bevirke en en-cellesyklus divisjon forsinkelse og ploiditet duplisering. En modifisert versjon av denne protokollen kan bli bruktå indusere ploidinummer endringer i andre dyrearter.