Sheathless Eletroforese Capilar-Espectrometria de Massa para Metabolic Profiling de amostras biológicas

Em metaboloma, uma vasta gama de técnicas de análise é utilizado para o perfil global (endógenas) metabolitos em amostras complexas. Neste trabalho, um protocolo é apresentado pela análise de metabolitos aniónicos e catiónicos em amostras biológicas por electroforese capilar de espectrometria de massa (CE-MS). CE está bem adequada para a análise de metabolitos altamente polares e carregados como os compostos são separados com base na sua razão de carga-a-tamanho. Um design sheathless interface desenvolvida recentemente, ou seja, uma interface de ponta porosa, é usado para o acoplamento de CE em ionização por electrospray (ESI) MS. Esta abordagem interface permite o uso eficaz da propriedade intrínseca de baixo fluxo de CE em combinação com MS, resultando em limites de detecção nanomolares para uma ampla gama de classes de metabolitos polares. O protocolo aqui apresentado é baseado no emprego de um nu capilar de sílica fundida com um emissor de ponta porosa em condições de separação de pH baixo para a análise de umampla gama de classes de metabolitos em amostras biológicas. Demonstrou-se que o mesmo método sheathless CE-MS pode ser usado para a caracterização de metabolitos catiónicos, incluindo aminoácidos, nucleósidos e péptidos pequenos, ou metabolitos aniónicos, incluindo fosfatos de açúcar, nucleótidos e ácidos orgânicos, por única interrupção da detecção por MS e separação polaridade da tensão. Altamente rico em informação perfis metabólicos em várias amostras biológicas, tais como a urina, fluido cerebrospinal e extractos da linha de células de glioblastoma, pode ser obtido por este protocolo em menos de 1 hora de análise CE-MS.