JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

עבודה זו מתארת ​​פרוטוקול המשתמש בגישה המוטמעת ברכיבים לחישוב רגישות לאלרגנים של אבקת דשא, בקרב קבוצה של מטופלים מדרום סין עם נזלת אלרגית ו / או אסטמה.

Abstract

רגישות לאבקת דשא מטילה סיכון עולמי למחלות דרכי הנשימה האלרגיות. למרות המניעה מסתמך על החקירה המקומית של אלרגנים אבקה, נתונים בנושא זה מוגבלים בדרום סין. כל הנתונים הזמינים התקבלו על ידי שאלונים של דיווח עצמי, בדיקות זין בעור, ומבחני IgE הכוללים או ספציפיים באמצעות תמציות גולמיות. מסיבות רבות, שיטות אלה אינן אמינות. תגובה תגובתית לדגי ברמודה, דשא של טימותי, וחומולוס משפשף אלרגנים בקוהורט של חולים מגולדו גואנגג'ואו (העיר הגדולה ביותר בדרום סין ופאתייה), עם דלקת נזלת אלרגית ו / או אסטמה נבדקו באמצעות מנתח אימונו-אוטומטי אוטומטי כמרכיב כלי אבחון לפתרון בעיות (CRD).

בפעם הראשונה, שכיחות גבוהה משמעותית של חיובי הדגימה של ברמודה הדגימה הודגמה אצל הדרוזים הסינים עם נזלת אלרגית ו / או אסטמה. בחולים אלה, שכיחות מתוחכמת של רגישותאל הדשא של טימותי ו - Humulus scandens צוין גם, אשר עשוי לנבוע תגובתיות, כמו שני האחרונים אינם נפוצים באזור. זה נתמך גם על ידי זיהוי של רכיבי אלרגן.

ניתוחים אימונואזיים אוטומטיים לחלוטין עשויים להציע עקביות משביעת רצון בין אזורים, מעבדות ומוסדות ועם הזמן. האוטומטיות של המכשיר עשויה לאפשר זיהוי סטנדרטי שלא היה מתגלה בקלות לפני הופעתו של CRD.

זהו מחקר המשתמש בגישת CRD כדי לחקור רגישות לאלרגנים של אבקת הדשא בדרום סין. זה מוסיף עדויות הנוכחי בספרות. נדרשים מחקרים עתידיים כדי לאמת את הממצאים הללו. עם זאת, למרות CRD הוא כלי שימושי, הממצאים שנעשו עם מנתח אוטומטי אוטומטי immunoassay לא צריך להחליף חקירות מעבדה אחרים, הערכות קליניות, המומחיות לרופא.

Introduction

אבקת הדשא מהווה כמעט 50% מהאלרגיות הקשורות באימונוגלובולין E (IgE), ובגלל אופייה המוטס, מטילה סיכון עולמי למחלות דרכי הנשימה האלרגיות, בייחוד אסטמה ונזלת אלרגית 1 , 2 , 3 , 4 . מניעה נגד אלרגיות אבקת הדשא באזור מסתמכת על מידע על ההפצה המקומית של אלרגנים אבקה. לרוע המזל, הספקטרום של האלרגנים המרגישים משתנה ממקום למקום - תצפית הנקראת בדרך כלל סגוליות אזורית.

בסין, טריטוריה מזרחית-אסיאתית גדולה, סגוליות אזורית של רגישות לאבקת הדשא מסובכת עוד יותר על ידי נתונים מוגבלים הקיימים כיום בחלק הדרומי של המדינה במהלך העשורים האחרונים 5 . מיעוט כזה בנתונים הוביל לקושי להציג את הדשא הכולל אבקה sensiטיציון במדינה גדולה זו 6 . בנוסף, הנתונים המצומצמים ביותר על הדרומי הסיני התקבלו במידה רבה משאלוני דיווח עצמי, בדיקות זין בעור (ולא בדיקות מעבדה), סך מדידות IgE (ולא IgE ספציפיות לאלרגיה), וגילוי sIg לאלרגנים ( ולא למולקולות של אלרגן).

דיווח עצמי של סימפטומים אלרגיים יכול להיות אמין כאשר אלרגנים ספציפיים מודאגים. בדיקות זין עור, אם כי נרחב נגיש, כרוך בשימוש של אלרגנים שאינם סטנדרטיים, תמציות אלרגן, אשר בעצמם עשויים להכיל מרכיבים רגישים אחרים המעוררים את הפרשנות התוצאה. האמינות של בדיקת הזין עור גם מבחינה ביקורתית תלוי מניפולציה מיומן על ידי אלרגיסטים או אחיות מומחה, שימוש היסטמין האחרונות, תאימות המטופל (לפעמים קשה מאוד עבור ילדים צעירים). סך הכל IgE שימושי עבור סינון אלרגיה, אבל לא באופן הגיוני לקבוע thהפוגעות באלרגנים בחולה. יתר על כן, כמעט כל אלרגנים מכילים מספר מולקולות רכיב אלרגן. רגישות למרכיבים העיקריים ( כלומר, d 1 p ו d 2 p מתוך קרדית האבק הבית) עשוי להצביע על "אלרגיה" אמיתית (אלרגיה לאלרגן ספציפי, ולא חיוביות כוזבת עקב תגובות צולבות עם אלרגנים אחרים), אבל רגישות לאלו מסוימים ( כלומר, cross-reactive Der 10, טרופיומיזין) לא יכול להיות 7 .

לפני שהוכנסו אבחונים של רכיבים (CRD), הכשלים המאכזבים האלה גרמו ללימודי אלרגן בסין. CRD מזהה במדויק את מרכיבי האלרגן באמצעות מולקולות אלרגניות רקומביננטיות או מטוהרות, ובכך הופך את המדידה לכמותית וניתנת לאפיון בקלות. בעשורים האחרונים, מחקרים אלרגיה לעתים קרובות מועסקים תמציות גס של אלרגנים כי בהכרח להכיל מספר מרכיבים לא רלוונטיים. רבים של אלה שיתוףMponents הם אינרטי, אבל לפעמים, כמה יכול להוביל תגובות חיוביות confounding. השימוש במולקולות אלרגניות רקומביננטיות או מטוהרות ב CRD יכול לעקוף את זה ולכן לספק דיוק הבדיקה טובה יותר. כאשר מעובדים microarrays, גישה CRD במהירות מסכים או מזהה רגישות למאות מולקולות אלרגן בנושאים בודדים. מחקר מתוכנן היטב ל- CRD על רגישות לאבקת הדשא בדרום סין חסר כעת. באופן אידיאלי, מחקר כזה צריך לכלול אוכלוסייה מקומית של כיסוי גיאוגרפי ניכר, להסביר אבקות דשא שדווחו בדרך כלל בסין, ולטפל בהיבטים הטכניים שהוזכרו לעיל. כדי להגיע לרמה מעשית של הרלוונטיות הקלינית וכדי להקל על גיוס דגימות בסרום, החקירה המוקדמת על רגישות לאבקת עשב כאלרגנים משאיפים יכולה להיות ממוקדת גם בחולים עם הפרעות נשימה אלרגיות, ולא באוכלוסייה הכללית.

עבודה זו מתארת ​​שיטההשתמשו בבדיקת תגובת sIgE בדם לעמק ברמודה, דשא טימותי, וחומולוס scandens בחולים של גואנגג'ואו הגדול (העיר הגדולה ביותר בדרום סין ופאתייה) עם נזלת אלרגית ו / או אסתמה באמצעות הגישה CRD 5 . ממצאים אלה על רגישות לאבקת הדשא הסובטרופית והמתונה בדרום סין מוסיפים ראיות חשובות לאלה הקיימים כיום בספרות.

Protocol

פרוטוקול המחקר, כולל שימוש מדגם אנושי בסרום, אושר על ידי ועדת האתיקה, בית החולים המשויך הראשון של אוניברסיטת גואנגזו רפואי. כל המשתתפים הציעו הסכמה מדעת בכתב, באופן עצמאי או באמצעות הוריהם (במקרה של ילדים). הפרוטוקול נרשם באופן מקוון (סינית הרישום הקליני משפט, רג לא: ChiCTR-DCC-13004003, עיין http://www.chictr.org/cn/).

1. זיהוי אוכלוסיית המחקר

הערה: מאגר המידע לאלרגיה של מעבדה מרכזית למחלות נשימתיות (AIR-SKLRD) הוא המקור העיקרי לגיוס חולים, משום ש- AIR הוא מאגר הנתונים הגדול ביותר המתועד היטב של מטופלים לבדיקות אלרגנים בדרום סין 9 , 10 . AIR כבר אחסון דגימות בסרום של חולים במשך כמעט עשור. בקצרה, אלה דגימות מאוחסנים הוכנו בעבר על ידי centrifuging 5 מ"ל oדם phesbotomized ורידי במשך 10 דקות ב 3000 xg ו מחלים supernatant. דגימות בסרום הוכנסו -80 מעלות צלזיוס מקררים לאחסון לטווח ארוך. דוגמאות שעמדו בקריטריונים להכללת המטופלים היו מוכנות לשימוש עבור כל הבדיקות במחקר הנוכחי.

  1. מתוך מאגר הנתונים AIR, לאחזר נתונים על חולים עם נזלת אלרגית ו / או אסטמה שעברו בדיקות בסרום עבור serge אלרגן דשא בין ינואר 2013 ליוני 2015, תקופת המחקר תוכנן מראש.
  2. בחרו בחולים עם נזלת אלרגית קלה ו / או אסטמה בהתאם ל - Alergic Rhinitis והשפעתו על אסטמה (ARIA) 11 ואת הנחיות היוזמה הכללית לאסטמה (GINA) 12 . הקצה אותם כ"קבוצת המחקר ".
  3. לא לכלול חולים עם רישומים רפואיים לא מלאים, אלה שאבדו למעקב, מי מסרבים לתת הסכמה מדעת לגבי השימוש בדגימות שלהם למטרות מדעיות, אלה עם מזוהה אנימינונים, אלה הנמצאים כיום בטיפול אימונוטרפי או בחומרים אימונומודולטוריים, או אלה שנמצאו זיהומים טפיליים.
  4. בחר קוהורט עכשווי של חולים עם אלרגיות לא-נשימתיות ( כלומר אקזמה, אלרגיות דרמטיטיס ואלרגיה למזון), לפי אותם קריטריונים של אי הכללה והקצה אותם כקבוצת הביקורת.
  5. ודא כי דגימות בסרום נאספו לפני כל מרשמים או טיפולים ניתנו כדי למזער את ההשפעות המבלבלות על ממצאי המעבדה. לא לכלול מדגם בסרום שאינו עומד בדרישה זו.
  6. ודא כי כל הנושאים הם תושבי קבע מכל חלקי גואנגג'ואו רבתי ( כלומר, נולד או גר שם במשך יותר מ -10 שנים).

2. מחקר זרימה ומדידות של עניין

  1. אחזור דגימות בסרום של חולים זכאים מהביו-בנק. כדי לבדוק רכיב אלרגן / אלרגן, להשתמש 140 μL של סרום (כולל 100 μL למלאאת החלל המת).
    הערה: נפח הסרום הכולל המרבי הנדרש עבור כל מטופל במחקר זה הוא: 3 אלרגנים ספציפיים ו 8 רכיבי אלרגן, sIgE = 140 μL * 11 = 1,540 μL.
  2. בעת שימוש בכלי זה, בעיקר לבדוק את דגימות בסרום עבור sIgEs לאלרגנים שלמים של הדשא ברמודה, דשא טימותי, ואת Humulus scandens . בצע את ההוראות בסעיף 3.
    הערה: אבקות אלה נבחרו עבור המדידות כי ברמודה הדשא 13 , 14 , 15 ו Humulus scandens 16 כבר דיווחו נרחב בסין, בעוד טימותי הדשא 17 , 18 , 19 הוא מין צמח טיפוסי שחי בסביבות החל טרופי כדי ממוזג אזורי הוא למד ביותר בעולם.
  3. שנית, לבדוק את דגימות בסרום מזוהה בשלב 2.3 ישאלרגנים שלמים אל נוכחותם של מרכיבים לאלרגנים של ברמודה [Cyn d 1 (g216)], Timothy [Phlp 1 (g205), Phl p 4 (g208), Phl p 5 (g215), Phl p 6 (g209 ), Phl p 7 (g210), Phl p 11 (g211), ו- pl p 12 (g212)], ודטרמינציות פחמימות חוצות-תגובתי [CCD (o214)]. בצע את ההוראות בסעיף 3.

3. נוהל בדיקה אוטומטי לחלוטין באמצעות מערכת ניתוח Immunoassay

הערה: ההליך כולו של בדיקות אלרגן sIgE, אשר אוטומטי לחלוטין תוארה במקום אחר 7 , 8 , 9 , 10 , בעקבות פרוטוקול של היצרן.

  1. הפעל את אוטומטי לחלוטין immunoassay Analyzer ( למשל, ImmunoCAP1000) ולהשתמש בו כדי לבצע את immunoassay לאורך כל המחקר. הפעל את המחשב המובנה לניהול מידע (IDM).
    הערה: אנאלי immunoassayYzer הוא באופן קבוע במצב המתנה.
  2. עם "כוח ראשוני" ב, להפעיל את "מערכת Power" ולחכות 3 דקות עד מובנית התוכנה מתחילה. לחץ על "טען שטיפה פתרון" ו "טען כביסה פתרון."
  3. הוסף 140 μL של סרום בקבוקון עבור כל רכיב אלרגן / אלרגן הבדיקה. תווית כל בקבוקון המכיל 140 μL של נסיוב עם מספר זיהוי ייחודי לכל חולה.
  4. מממשק ה- IDM, בצע את השלבים הבאים על-ידי לחיצה על התפריט.
    1. בדוק את "רשימת רשימת" חלון על IDM כדי לוודא כי "sIgE" היא שיטת הבדיקה של בחירה.
    2. טען את צינורות מדגם לתוך המדפים מדגם ואת בקרת איכות צינורות לתוך המדפים בקרת איכות, עם ברקודים.
      הערה: עבור כל מטופל, הבדיקה תוכננה תחילה עבור sIgE ל -3 אלרגנים ספציפיים ו -8 רכיבי אלרגן, או 346 * 11 (3,806) צינורות מדגם. עבור כל צינור מדגם, 3 צינורות בקרת איכותהמכילים רמות נמוכות, בינוניות וגבוהות של בקרת sIgE (ראה טבלת חומרים לפרטים) תואמו. בסופו של דבר, רק 58 חולים שנבדקו במבחן הראשוני (שלב 2.3) נבדקו עוד יותר במבחן המשני (שלב 2.3). טעינה של צינורות ניתן להגדיר באופן אוטומטי על קונסולת המחשב.
    3. בחר "טען ריאגנטים" במסך "עיבוד Assay". השלם את הטעינה של המדגם ואת איכות מדפים, פתרון פיתוח, מצומד, כיילים, מוביל, טיפים פיפטה, פתרון להפסיק, פתרון כביסה על פי "Loadlist" (ראה טבלה של חומרים לפרטים).
    4. ב "טען ולהתחיל," לחץ על "אישור".
      הערה: בתום המדידה, התוצאות מופיעות ב - IDM.
    5. בממשק ה- IDM, בחר את הנתונים שייוצאו. לחץ על "תפריט", "אישור", ו "שמירה בשם" ולייצא את תוצאות המדידה sIgE כקובץ גיליון אלקטרוני.
      6. ייבא את קובץ הגיליון האלקטרוני לתוכנה סטטיסטית ( לדוגמה, SPSS) 10 . באמצעות מודול ספציפי למקדמי Spearman מתפריט SPSS, לנתח את המתאמים ברגישות בין אבקות הדשא האלה (sije חיובי לאלרגן שלם) לבין רכיבי אבקה (sije חיובי למולקולות האלרגן).

4. הגדרת תגובת sIgE

הערה: עבור הדגימה בסרום שלא נבדקה, טווח המדידה IgE הספציפי הוא 0.35 עד 100 kU / L.

  1. לדלל את הדגימות עם ערכי sIgE> 100 KU / L 1: 5 ו assay מחדש. כאשר הערך נשאר גבוה מ -100 kU / L, המשך עם דילולים נוספים עד שהגיע לרמה של נקודת קצה עד 1,000 KU / L.
  2. בהתבסס על ערך הסף של 0.35 kU / L, שקול רמת sigE העולה על 0.35 kU / L כדי להיות חיובי 5 , 7 , 10 . דרג את התגובה(≥0.70 ו <3.50 kU / L), דרגה 3 (≥ 3.50 ו <17.50 kU / L), דרגה 4 (≥ ≥0,0 ו - <0.70 kU / L) 17.50 ו <50.00 kU / L), מחלקה 5 (50 ≥ 50.00 ו <100.00 KU / L), ואת הכיתה 6 (≥100.00 KU / L).

5. ניתוח סטטיסטי

  1. לנתח את הנתונים עם תוכנה סטטיסטית ( למשל, SPSS) 10 . דווח על הנתונים הכמותיים כסטייה הממוצעת וסטית התקן, הנתונים האיכותיים כטווח החציוני והטווח הבין - רבעוני (IQR) והנתונים הקטגוריים כשיעור התוצאות החיוביות.
  2. השתמש במבחן צ'י מרובע להשוואה בין קבוצות של פרופורציות, בדיקת t לא מסודרת לנתונים כמותיים, ובדיקת סכום כולל של נתונים איכותיים.
  3. השתמש במבחן Pearson לניתוח המיתאם בין נתונים פרמטריים, כאשר מקדמי המתאם מתבטאים כ - r, ובדיקת Spearman לערכים לא פרמטריים, עם tמקדמי המתאם מתבטאים כ " r . S ". שקול משמעות סטטיסטית להיות כאשר P- Values ​​<0.05.

תוצאות

מנתח החיסון האוטומטי לחלוטין המשמש במחקר זה יש מבנה שלב מוצק מכוסה באלרגנים צימוד קוולנטיים או אלרגן רכיבים המגיבים עם מולקולות של עניין (sIgE) בדגימות בסרום מן המטופל. עם תוכנית אוטומטית, Analyzer שוטף את כל IgEs שאינם ספציפיים עם μL 150 של פתרון לשטוף וחוזר ?...

Discussion

ניתוחים אימונואזיים אוטומטיים לחלוטין עשויים להציע עקביות משביעת רצון בין אזורים, מעבדות ומוסדות ועם הזמן. הליך אוטומטי זה נמצא באופן משמעותי כדי לתמוך במחקר הספסל ומחקרים קליניים, לאפשר זיהוי סטנדרטי של אלרגנים רבים ו / או אלרגן רכיבים, ולזהות אלרגנים סבירות סביר כ...

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

אנו מודים Yueming Su על עזרתו בהכנת הדמות. מחקר זה מומן על ידי קרן גואנגדונג של מדע וטכנולוגיה (פרויקט מס ': 2014A020212352), גואנגזו החינוך הלשכה (1201630044, 1201630393) ואת הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (NSFC 81572063, NSFC 81601394).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
ImmunoCAP 1000 InstrumentThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)12-3800-01
Phadia Information Data Manager Software PackageThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)12-3801-11
Software Package, ImmunoCAP 1000Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)12-3801-12
g2
(Bermuda grass)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-4131-01
g6
(Timothy grass)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-4100-01
w22
(Japanese Hop)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-4452-01
g216
(nCyn d 1)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-4972-01
g205
(rPhl p 1)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5234-01
g208
(nPhl p 4)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5288-01
g215
(rPhl p 5b)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5338-01
g209
(rPhl p 6)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5289-01
g210
(rPhl p 7)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5290-01
g211
(rPhl p 11)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5291-01
g212
(rPhl p 12)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5292-01
o214
Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs)		Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-5339-01
Specific IgE Conjugate 400Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9310-08
Specific IgE Calibrator StripThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9459-08
Specific IgE Curve Control StripThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9312-08
Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAPThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)14-4417-01
ImmunoCAP Specific IgE Negative ControlThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9445-01
ImmunoCAP Specific IgE Control LThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9528-01
ImmunoCAP Specific IgE Control MThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9529-01
ImmunoCAP Specific IgE Control HThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9530-01
Development SolutionThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9439-08
Stop SolutionThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)34-2271-58
Washing SolutionThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9202-08
FluoroCThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9264-01
Maintenance Solution KitThermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden)10-9476-01

References

  1. Scadding, G. K. BSACI guidelines for the management of allergic and non-allergic rhinitis. Clin Exp Allergy. 38 (1), 19-42 (2007).
  2. Pollart, S. M., Reid, M. J., Fling, J. A., Chapman, M. D., Platts-Mills, T. A. Epidemiology of emergency room asthma in northern California: association with IgE antibody to rye grass pollen. J Allergy Clin Immunol. 82 (2), 224-230 (1988).
  3. Wang, Q. Lower airway inflammation and hyperresponsiveness in non-asthmatic patients with non-allergic rhinitis. J Thorac Dis. 7 (10), 1756-1764 (2015).
  4. Ma, Y. The link between mold sensitivity and asthma severity in a cohort of northern Chinese patients. J Thorac Dis. 7 (4), 585-590 (2015).
  5. Luo, W. Major grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Mol Immunol. 78, 105-112 (2016).
  6. Zhang, Y., Zhang, L. Prevalence of allergic rhinitis in china. Allergy Asthma Immunol Res. 6 (2), 105-113 (2014).
  7. Zeng, G., Zheng, P., Luo, W., Huang, H., Wei, N., Sun, B. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Mol Immunol. 74, 1-9 (2016).
  8. Kleine-Tebbe, J., Matricardi, P. M., Hamilton, R. G. Allergy work-up including component-resolved diagnosis: how to make allergen-specific immunotherapy more specific. Immunol Allergy Clin North Am. 36 (1), 191-203 (2016).
  9. Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, southern China. PLoS One. 9 (5), e94776 (2014).
  10. Zeng, G. Component-resolved diagnostic study of Dermatophagoides pteronyssinus major allergen molecules in a southern Chinese cohort. J Investig Allergol Clin Immunol. 25 (5), 343-351 (2015).
  11. Liu, J., Guo, A., Guo, H. Morphological variation and types of Cynodon dactylon. Acta Prataculture Sinica. 12 (6), 99-104 (2003).
  12. Zhang, H., Xi, J. Study on the germplasm resource and ecological characteristics of wild carpet grass (Axonopus compressus) in Guangdong. Grassland and Turf. 13 (1), 25-28 (2005).
  13. Kao, S. H., Su, S. N., Huang, S. W. Sub-proteome analysis of novel IgE-binding proteins from Bermuda grass pollen. Proteomics. 5 (14), 3805-3813 (2005).
  14. Ouyang, Y. H., Zhang, D. S., Fan, E. Z., Li, Y., Zhang, L. Correlation between symptoms of pollen allergic rhinitis and pollen grain spreading in summer and autumn. Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Waike Zazhi. 47 (8), 623-627 (2012).
  15. Westritschnig, K. Analysis of the sensitization profile towards allergens in central Africa. Clin Exp Allergy. 33 (1), 22-27 (2003).
  16. Rossi, R. E., Monasterolo, G., Monasterolo, S. Measurement of IgE antibodies against purified grass-pollen allergens (Phl p 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, and 12) in sera of patients allergic to grass pollen. Allergy. 52 (12), 1180-1185 (2001).
  17. Zafred, D., Nandy, A., Pump, L., Kahlert, H., Keller, W. Crystal structure and immunologic characterization of the major grass pollen allergen Phl p 4. J Allergy Clin Immunol. 132 (3), 696-703 (2013).
  18. Chabre, H. Molecular variability of group 1 and 5grass pollen allergens between Pooideae species: implications for immunotherapy. Clin Exp Allergy. 40 (3), 505-519 (2010).
  19. Mari, A. Skin test with a timothy grass (Phleum pratense) pollen extract vs.IgE to a timothy extract vs. IgE to rPhl p 1 rPhl p 2, nPhl p 4, rPhl p 5, rPhl p 6, rPhl p 7, rPhl p 11, and rPhl p 12: epidemiological and diagnostic data. Clin Exp Allergy. 33 (1), 43-51 (2003).
  20. Grote, M., Stumvoll, S., Reichelt, R., Lidholm, J., Rudolf, V. Identification of an allergen related to Phl p 4, a major timothy grass pollen allergen, in pollens, vegetables, and fruits by immunogold electron microscopy. Biol Chem. 383 (9), 1441-1445 (2002).
  21. Andersson, K., Lidholm, J. Characteristics and immunobiology of grass pollen allergens. Int Arch Allergy Immunol. 130 (2), 87-107 (2003).
  22. Tripodi, S. Molecular profiles of IgE to Phleum pratense in children with grass pollen allergy: implications for specific immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 129 (3), 834-839 (2012).
  23. Stumvoll, S., et al. Purification, structural and immunological characterization of a timothy grass (Phleum pratense) pollen allergen Phl p 4, with cross-reactive potential. Biol Chem. 383 (9), 1383-1396 (2002).
  24. Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Ann Allergy Asthma Immunol. 99 (1), 34-41 (2007).
  25. Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (IgE) tests performed by different assay systems. J Allergy Clin Immunol. 121 (5), 1219-1224 (2008).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

124

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved