Visualiseren van Lignification Dynamics in planten met Klik op chemie: Dual Labeling is BLISS!

Lignine is een van de meest voorkomende biopolymeren op de planeet en een belangrijk onderdeel van lignocellulose biomassa. Dit fenolische polymeer speelt een vitale structurele en beschermende rol in de ontwikkeling en de levensduur van hogere planten. Hoewel de ingewikkelde mechanismen tot regeling van lignification processen in vivo sterk de industriële valorisatie van vele plantgerelateerde producten beïnvloeden, heeft de wetenschappelijke gemeenschap nog steeds een lange weg te gaan om te ontcijferen hen. In een eenvoudige werkstroom van drie-stap kunnen de dubbele labeling protocol hier vermelde bioimaging studies van actief lignifying zones van plantaardige weefsels. De eerste stap bestaat in de metabole omzetting van twee onafhankelijke chemische verslaggevers, surrogaten van de twee inheemse monolignolen die aanleiding tot lignine H - en G-eenheden geven. Na opneming van de groeiende lignine polymeren, elke verslaggever vervolgens specifiek heet met eigen fluorescente sonde via een sequentiële combinatie van bioorthogonal SPAAC/CuAAC Klik op reacties. In combinatie met lignine autofluorescence, deze aanpak leidt tot het genereren van kaarten van de drie kleuren lokalisatie van lignine binnen plantaardige celwanden door confocal fluorescentie microscopie en precieze ruimtelijke informatie over de aanwezigheid of afwezigheid van actieve lignification machines op de schaal van plantaardige weefsels, cellen en verschillende celwand lagen.