Abstract
Chemistry
La lignine est un des biopolymères plus répandues sur la planète et une composante importante de la biomasse lignocellulosique. Ce polymère phénolique joue un rôle structurel et protecteur dans le développement et la vie des plantes supérieures. Bien que les mécanismes complexes qui régissent lignification processus en vivo fortement un impact sur la valorisation industrielle de nombreux produits d’origine végétale, la communauté scientifique a encore un long chemin à parcourir pour déchiffrer. Dans un flux de travail trois étapes simple, le double étiquetage protocole présenté ci-après permet bioimaging études de lignifying activement les zones de tissus végétaux. La première étape consiste en l’incorporation métabolique des deux journalistes indépendants chimiques, substituts des deux monolignols natives qui donnent lieu à la lignine H - et G-unités. Après incorporation dans les polymères de lignine de plus en plus, chaque journaliste est spécifiquement étiqueté avec sa propre sonde fluorescente via une combinaison séquentielle SPAAC/CuAAC clic des réactions de bioorthogonal. Combiné avec la lignine autofluorescence, cette approche conduit à la génération des cartes de localisation trois couleurs de lignine dans les parois cellulaires des plantes par microscopie confocal fluorescence et fournit des informations spatiales précises sur la présence ou l’absence d’actif Machines de lignification à l’échelle des tissus végétaux, les cellules et les couches différentes cellules pariétales.
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