Abstract
Chemistry
Lignin er en av de vanligste biopolymers på planeten og en viktig komponent i lignocellulosic biomasse. Dette fenoliske polymer spiller en viktig strukturelle og beskyttende rolle i utvikling og liv for høyere planter. Selv om de intrikate mekanismene regulere lignification prosesser i vivo sterkt påvirke den industrielle valorization av mange plante-avledet produkter, har det vitenskapelige samfunnet fortsatt en lang vei å gå for å dechiffrere dem. I en enkel tretrinns arbeidsflyt kan doble merking protokollen presenteres her bioimaging studier av aktivt lignifying soner av anlegget vev. Det første trinnet består i metabolske inkorporering av to uavhengige kjemiske journalister, surrogater av de to opprinnelige monolignols som gir opphav til lignin H - og G-enheter. Etter innlemmelse i voksende lignin polymerer, er hver reporter deretter spesielt merket med en egen fluorescerende sonde via en sekvensiell kombinasjon av bioorthogonal SPAAC/CuAAC Klikk reaksjoner. Kombinert med lignin autofluorescence, dette fører til generering av tre farger lokalisering kart av lignin innenfor anlegget cellen vegger av fluorescens AC confocal mikroskopi og gir presis romlig informasjon om tilstedeværelse eller fravær av aktive lignification maskiner i omfanget av anlegg vev, celler og ulike cellevegg lag.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved