Visualisera Lignification Dynamics i anläggningar med Klicka på kemi: dubbel märkning är BLISS!

Lignin är en av de vanligaste biopolymerer på planeten och en viktig del av lignocellulosa biomassa. Denna fenoliska polymer spelar en viktig strukturell och skyddande roll i utvecklingen och livet av högre växter. Även om de intrikata mekanismer som reglerar lignification processer i vivo starkt påverkar de industriella valorizationen av många vegetabiliska produkter, har det vetenskapliga samfundet fortfarande en lång väg att gå för att dechiffrera dem. I ett enkelt arbetsflöde i tre steg gör dubbel märkning protokollet presenteras häri bioimaging studier av aktivt lignifying zoner av växt vävnader. Det första steget består i metabola införlivandet av två oberoende kemiska reportrar, ersättningar för de två inhemska monolignoler som ger upphov till lignin H - och G-enheter. Efter inblandning i växande lignin polymerer, är varje reporter sedan specifikt märkt med egen fluorescerande sond via en sekventiell kombination av bioorthogonal SPAAC/CuAAC Klicka reaktioner. Kombinerat med lignin autofluorescens, detta synsätt leder till generation av tre färger lokalisering kartor av lignin i växternas cellväggar av confocal fluorescensmikroskopi och ger exakt rumslig information på närvaro eller frånvaro av aktiva lignification maskiner på omfattningen av växt vävnader, celler och olika cellväggen lager.