JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Genetics

التحقيق في توليف الحمض النووي الريبي استخدام الوسم 5-بروموريديني وإيمونوبريسيبيتيشن

Published: May 3rd, 2018

DOI:

10.3791/57056

1DANDRITE - Danish Research Institute of Translational Neuroscience, Dept. of Biomedicine, Aarhus University, 2Dept. of Molecular Biology and Genetics, Aarhus University

Abstract

عند مستويات الدولة ثابت الحمض النووي الريبي مقارنة بين هذين الشرطين، من غير الممكن التمييز بين ما إذا كانت التغييرات هي الناجمة عن التغييرات في الإنتاج أو تدهور للجيش الملكي النيبالي. ويصف هذا البروتوكول وسيلة لقياس إنتاج الحمض النووي الريبي، استخدام 5-بروموريديني وسم الحمض النووي الريبي يليه إيمونوبريسيبيتيشن، الذي يتيح التحقيق في الجيش الملكي النيبالي توليفها في إطار زمني قصير (مثلاً، ح 1). ميزة وضع العلامات 5-بروموريديني وإيمونوبريسيبيتيشن على استعمال مثبطات النسخي السامة، مثل α-أمانيتين ووالاكيتنوميسين د، أن هناك لا أو تأثيرات منخفضة جداً على بقاء الخلية أثناء الاستخدام القصير الأجل. بيد لأن 5-بروموريديني-إيمونوبريسيبيتيشن فقط يلتقط الجيش الملكي النيبالي المنتجة في الوقت القصير التوسيم، أنتجت ببطء، فضلا عن سرعة التدهور يمكن أن الحمض النووي الريبي يصعب قياسه بهذه الطريقة. يمكن تحليل استولت عليها 5-بروموريديني-إيمونوبريسيبيتيشن الجيش الملكي النيبالي 5-بروموريديني-المسمى بالنسخ العكسي والكمية تفاعل البوليميراز المتسلسل، وتسلسل الجيل القادم. يمكن أن يحقق في جميع أنواع من الحمض النووي الريبي، والأسلوب الذي لا يقتصر على قياس مرناً كما يرد في هذا المثال.

Explore More Videos

135 5

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved