A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Genetics
عند مستويات الدولة ثابت الحمض النووي الريبي مقارنة بين هذين الشرطين، من غير الممكن التمييز بين ما إذا كانت التغييرات هي الناجمة عن التغييرات في الإنتاج أو تدهور للجيش الملكي النيبالي. ويصف هذا البروتوكول وسيلة لقياس إنتاج الحمض النووي الريبي، استخدام 5-بروموريديني وسم الحمض النووي الريبي يليه إيمونوبريسيبيتيشن، الذي يتيح التحقيق في الجيش الملكي النيبالي توليفها في إطار زمني قصير (مثلاً، ح 1). ميزة وضع العلامات 5-بروموريديني وإيمونوبريسيبيتيشن على استعمال مثبطات النسخي السامة، مثل α-أمانيتين ووالاكيتنوميسين د، أن هناك لا أو تأثيرات منخفضة جداً على بقاء الخلية أثناء الاستخدام القصير الأجل. بيد لأن 5-بروموريديني-إيمونوبريسيبيتيشن فقط يلتقط الجيش الملكي النيبالي المنتجة في الوقت القصير التوسيم، أنتجت ببطء، فضلا عن سرعة التدهور يمكن أن الحمض النووي الريبي يصعب قياسه بهذه الطريقة. يمكن تحليل استولت عليها 5-بروموريديني-إيمونوبريسيبيتيشن الجيش الملكي النيبالي 5-بروموريديني-المسمى بالنسخ العكسي والكمية تفاعل البوليميراز المتسلسل، وتسلسل الجيل القادم. يمكن أن يحقق في جميع أنواع من الحمض النووي الريبي، والأسلوب الذي لا يقتصر على قياس مرناً كما يرد في هذا المثال.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved