Een High-throughput Cre-Lox geactiveerd virale membraan Fusion Assay ter identificatie van de Inhibitors van HIV-1 virale membraan Fusion

Deze bepaling beoogt te specifiek verslag over HIV-1 fusion via de uitdrukking van de groen fluorescente proteïne (GFP) aantoonbaar door stroom cytometry of fluorescentie microscopie. Een HIV-1 verslaggever virus (HIV-1 Gag-iCre) wordt gegenereerd door het invoegen van Cre recombinase in het genoom van het HIV-1 tussen de matrix en de Eiwitmantel eiwitten van de Gag-polyprotein. Dit resulteert in een verpakking van Cre recombinase in virusdeeltjes, die vervolgens wordt vrijgegeven in een doelcel lijn stabiel uiting van een Cre recombinase-geactiveerde rode fluorescente proteïne (RFP) op GFP schakelaar cassette. In de basale staat drukt deze cassette RFP alleen. Na de levering van Cre recombinase in de doelcel, de RFP, geflankeerd door loxP sites, accijnzen, resulterend in GFP expressie. Deze test kan worden gebruikt om te testen alle remmers van virale toegang (specifiek aan de fusie stap) in cel-vrij en cel-naar-cel infectie systemen en een klasse te identificeren van de purinergic receptorantagonisten als roman remmers van HIV-1 virale membraan fusie is gebruikt.