En hög genomströmning Cre-Lox aktiveras Viral membran Fusion analys för att identifiera hämmare av HIV-1 Viral membran Fusion

Denna analys är designad att särskilt rapportera om HIV-1 fusion via uttrycket av grönt fluorescerande protein (GFP) upptäckas av flöde flödescytometri eller fluorescence mikroskopi. En HIV-1-reporter virus (HIV-1 Gag-iCre) genereras genom att infoga Cre recombinase i HIV-1 genomet mellan matris och kapsid proteiner av den Gag polyprotein. Detta resulterar i en förpackning av Cre recombinase in viruspartiklar, som släpps sedan ut i en målcell linje stabilt uttrycker en Cre recombinase-aktiverat röd fluorescerande protein (RFP) till GFP switch kassett. I den basala staten uttrycker denna kassett RFP endast. Efter leverans av Cre recombinase in i målcellen, på RFP, flankerad av loxP platser, punktskatter, vilket resulterar i GFP uttryck. Denna analys kan användas för att testa någon hämmare av viral inträde (särskilt vid fusion steg) i cell-fri och cell-till-cell infektion system och har använts för att identifiera en klass purinergic-receptorantagonister som roman hämmare av HIV-1 viral membran fusion.