心脏外免疫细胞的分离与鉴定

免疫系统是健康心脏的重要组成部分。心肌是一个丰富的不同免疫细胞亚群的家, 在稳定状态和不同形式的炎症期间功能划分。直到最近, 对心脏免疫细胞的研究需要使用显微镜或发育不良的消化协议, 这在严重炎症期间提供了足够的敏感性, 但无法自信地识别小但关键人群的稳定状态下的细胞。在这里, 我们讨论了一个简单的方法, 结合酶 (胶原酶, 透明质酸和 DNAse) 和机械消化的小鼠心脏之前的血管内管理荧光标记的抗体, 以区别较小但不可避免的血管内的细胞污染物。该方法通过流式细胞仪对细胞进行鉴定、分型和定量, 或通过荧光活化细胞分选或磁珠分离进一步纯化, 从而产生分离的活体细胞悬浮。转录分析或体外研究。我们包括一个分步流细胞分析的例子, 以区分关键的巨噬细胞和树突状体细胞群体的心脏。为中等大小实验 (10 心脏) 过程的完成要求 2–3 h。