Live-celle Imaging Assays til undersøgelse glioblastom hjerne Tumor stamcelle Migration og Invasion

Glioblastom (GBM) er en aggressiv hjernetumor, der styres dårligt med de aktuelt tilgængelige behandlingsmuligheder. Nøglefunktioner i GBMs omfatter hurtig spredning og pervasive invasion i den normale hjerne. Gentagelse menes at skyldes tilstedeværelsen af radio - og kemo-resistent hjerne tumor stamceller (BTSCs) at invadere fra den oprindelige kræft masse og dermed unddrage kirurgisk resektion. Derfor, behandlinger, der er rettet mod BTSCs og deres invasive evner kan forbedre den ellers dårlig prognose for denne sygdom. Vores gruppe og andre har med succes etableret og karakteriseret BTSC kulturer fra GBM patientprøver. Disse BTSC kulturer demonstrere grundlæggende kræft stamceller egenskaber såsom clonogenic selvfornyelse, multi lineage differentiering og tumor indledning i immun-mangelfuld mus. For at forbedre de nuværende terapeutiske tilgange til GBM, er en bedre forståelse af mekanismerne i BTSC migration og invasion nødvendigt. I GBM er undersøgelse af migration og invasion begrænset, dels på grund af begrænsninger af eksisterende teknikker, som ikke fuldt ud højde for in vitro- vækst egenskaber af BTSCs vokset som neurospheres. Her beskriver vi hurtig og kvantitative live-celle imaging assays for at studere både migration og invasion egenskaberne for BTSCs. Den første metode beskrevet er BTSC migration analysen, som måler migration mod et chemoattractant forløb. Den anden metode beskrevet er BTSC invasion assay som billeder og kvantificerer en cellulær invasion fra neurospheres ind i en matrix. Assays beskrevet her bruges til kvantificering af BTSC migration og invasion over tid og under forskellige betingelser.