高通量钙流量测定对甘氨酸/d-丝氨酸和谷氨酸敏感的 NMDA 受体的研究

n-甲基-d-天门冬氨酸 (NMDA) 受体 (NMDAR) 被归类为离子型谷氨酸受体, 在学习和记忆中具有重要作用。NMDAR 的故障, 表现为过度或活动不足造成的突变, 改变表达, 贩运, 或本地化, 可能导致许多疾病, 特别是在中枢神经系统。因此, 了解受体的生物学以及促进发现化合物和小分子, 对于目前防治神经系统疾病的努力至关重要。目前研究该受体的方法有限制, 包括低吞吐量, 高成本, 并无法研究其功能能力, 由于必要存在的渠道阻滞剂, 以防止 NMDAR 介导的兴奋。此外, 现有的检测系统只对谷氨酸的刺激很敏感, 对 NMDAR 的另一种共配体甘氨酸的刺激缺乏敏感性。在这里, 我们提出了第一个以板块为基础的高通量的检测方法, 研究一种对同配体、谷氨酸和 d-丝氨酸/甘氨酸有敏感性的 NMDA 受体。这种方法允许研究不同的 NMDAR 亚基组成, 并允许功能研究的受体在甘氨酸和/或谷氨酸敏感模式。此外, 该方法不需要在测量过程中存在抑制剂。通过本试验可以检测到正、负构调节剂的作用, 并在本系统中复制了 NMDAR 的已知药理学。该技术克服了现有方法的局限性, 具有很高的成本效益。我们相信, 这项新的技术将加快发现治疗 NMDAR 介导的病理。