JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Immunology and Infection

T7 bakteriyofaj Biopanning üzerinden kantitatif PCR

Published: September 27th, 2018

DOI:

10.3791/58165

1Division of Molecular Pharmaceutics and Drug Delivery, College of Pharmacy, University of Texas at Austin

Bu iletişim kuralı T7 phages fajının seçimi deneyler (Yani, "biopanning") üzerinden Numaralandırılacak kantitatif PCR (qPCR) kullanımını açıklar. qPCR DNA ölçmek için bir floresan tabanlı yaklaşımdır ve faj parçacıklar için bir proxy olarak faj genleri ölçmek için adapte işte. Bu protokol için yüksek sıcaklık ısıtma olmadan ek DNA arıtma kullanılarak facile faj DNA hazırlama yöntemi açıklanmıştır. Yöntemin yalnızca küçük hacimli ısı phages ve küçük hacimli qPCR tepki gerekir. qPCR yüksek üretilen iş ve hızlı, işlemek ve diğer fajının numaralandırma yaklaşımlar 2 – 4 h. ile karşılaştırıldığında tepkileri bir 96-şey tabak veri almak mümkün, qPCR daha zaman verimli olur. Burada, qPCR biopanning karşı vitro kistik fibrozis gibi mukus modeli üzerinden tespit T7 phages numaralandırmak için kullanılır. QPCR yöntemi T7 phages biopanning diğer türleri dahil olmak üzere diğer deneyler üzerinden ölçmek için genişletilebilir (e.g., protein bağlayıcı, içinde vivo immobilize fajının tarama) ve diğer kaynaklar (Örneğin, su sistemleri veya vücut sıvıları). Özet olarak, herhangi bir DNA kapsüllenmiş virüs ölçmek için bu iletişim kuralı değiştirilebilir.

Explore More Videos

mm noloji ve enfeksiyon

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved