Estrazione di caffeina, l'attività enzimatica e l'espressione genica della sintasi di caffeina da sospensioni di cellule vegetali

(1,3,7-trimetilxantina) la caffeina è un alcaloide della purina presente nelle popolari bevande quali caffè e tè. Questo metabolita secondario è considerato come una difesa chimica perché ha attività antimicrobica ed è considerato un insetticida naturale. La caffeina può anche produrre effetti negativi allelopatiche che impediscono la crescita di piante circostanti. Inoltre, persone in tutto il mondo consumano caffeina per i suoi effetti analgesici e stimolatori. A causa di interesse per le applicazioni tecnologiche di caffeina, ricerca sulla via biosintetica di questo composto è cresciuta. Questi studi si sono concentrati principalmente sulla comprensione dei meccanismi biochimici e molecolari che regolano la biosintesi di caffeina. Coltura in vitro del tessuto è diventato un sistema utile per lo studio di questa via biosintetica. Questo articolo descrive un protocollo dettagliato per la quantificazione di caffeina e per misurare i livelli di trascrizione del gene (CCS1) codifica caffeina sintasi (CS) in sospensioni di cellule di c. arabica L., come pure la sua attività.