تجميد التساهمية من البروتينات للتحليل الطيفي قوة جزيء واحد

في السنوات الأخيرة، إلى مجهر القوة الذرية (AFM) جزيء واحد قوة التحليل الطيفي (SMFS) توسيع فهمنا للخصائص الجزيئية ووظائفها. فإنه أتاح لنا الفرصة لاستكشاف تعدد الآليات الفيزيائية، مثلاً، كيف البكتيرية أدهيسينس ربط المستقبلات السطحية المضيف بمزيد من التفصيل. من بين عوامل أخرى، يتوقف نجاح تجارب SMFS على التثبيت الوظيفية وأصلي من الجزيئات الحيوية للفائدة على السطوح الصلبة ونصائح فؤاد. هنا، يمكننا وصف بروتوكول بسيط لاقتران التساهمية من البروتينات للأسطح السيليكون باستخدام سيلاني-شماعة-كاربوكسيلس والكيمياء N-hydroxysuccinimid/1-ethyl-3-(3-dimethyl-aminopropyl)carbodiimid (مؤسسة/دائرة الصحة الوطنية) راسخة في النظام لاستكشاف التفاعل بين الهياكل-1 أدهيسين ررجا من بكتيريا إيجابية العقدية الرئوية (س. نيمونيا) مع فيبرونيكتين البروتين المصفوفة خارج الخلية (الجبهة الوطنية). النتائج التي توصلنا إليها تظهر أن الروغان السطحية يؤدي إلى توزيع الجبهة الوطنية بصورة متجانسة على سطح الزجاج بتركيز مناسب من ررجا على طرف ناتئ فؤاد، الظاهر بقيمة تصل إلى 20 في المائة أحداث التفاعل أثناء SMFS الهدف القياسات وكشفت عن أن ررجا تربط بين الجبهة الوطنية بقوة يعني 52 pN. ويمكن تعديل البروتوكول للزوجين عن طريق مجموعات المواقع ثيول الحرة محددة. هذه النتائج في اتجاه بروتين أو جزيء المعرفة مسبقاً وهو مناسبة للتطبيقات الأخرى الفيزيائية الأحيائية إلى جانب SMFS.