JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Medicine

Een benadering In Vitro Fotodynamische therapie

Published: August 17th, 2018

DOI:

10.3791/58190

1Department of Dermatology, University of California, Davis, 2Dermatology Service, Sacramento VA Medical Center, 3Department of Dermatology, State University of New York, Downstate Medical Center

Fotodynamische therapie (PDT) is een medische procedure waarbij de broedtijd van een exogenously toegepaste fotosensitizer (PS) gevolgd door zichtbare lichte photoactivation voor het opwekken van cel apoptosis. De Federal Drug Administration heeft goedgekeurd voor de behandeling van actinische keratose PDT en klinische richtlijnen raden PDT als behandeling voor bepaalde niet-melanoom huidkanker en acne vulgaris. PDT is een voordelige therapeutische modaliteit als low-cost, niet-invasieve, en geassocieerd met minimale bijwerkingen en schrikken. In de eerste stap van PDT is een PS toegepast en toegestaan te accumuleren intracellulair. Latere lichte bestraling induceert de vorming van reactieve zuurstof soorten, die uiteindelijk tot cel apoptosis, verstoring van de membraan, mitochondriale schade, immuun modulatie, Keratinocyt proliferatie en collageen omzet leiden kan. Hierin presenteren wij een methode in vitro studie PDT in een aanhangend cellijn. Deze behandeling-protocol is ontworpen om te simuleren van PDT en kan worden aangepast aan het bestuderen van het gebruik van PDT met verschillende cellijnen, photosensitizers, incubatie temperaturen of photoactivation golflengten. Plaveiselcelcarcinoom cellen werden geïncubeerd met 0, 0.5, 1.0, en 2 mM 5-aminolevulinic acid (5-ALA) voor 30 min en photoactivated met 417 nm blauw licht voor 1.000 s. De maatregel van de primaire uitkomst was apoptosis en de necrose, zoals gemeten door de Annexine-V en 7-aminoactinomycin D stroom cytometry. Er was een verhoging van de dosis-afhankelijke in cel apoptosis na dertig minuten incubatie van 5-ALA. Om te bereiken hoge validiteit van Inter test, is het belangrijk om consistent incubatie en lichte parameters bij het uitvoeren van in vitro PDT experimenten. PDT is dat een nuttig klinische procedure en in vitro onderzoek kan toestaan voor de ontwikkeling van nieuwe PSs, optimalisatie van protocollen en nieuwe indicaties voor PDT.

Explore More Videos

Geneeskunde

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved