Abstract
Cancer Research
Kvantitativ analyse af menneskers genetiske variation er afgørende for at forstå de molekylære karakteristika af alvorlige medicinske tilstande, såsom tumorer. Fordi digital polymerase kædereaktion (PCR) aktiverer en præcis kvantificering af DNA kopi antal varianter, bliver de et vigtigt værktøj til påvisning af sjældne genetiske variationer, som resistente mutationer. Det forventes at molekylære diagnoser ved hjælp af digital PCR (dPCR) vil være tilgængelig i klinisk praksis i den nærmeste fremtid; således, hvordan man effektivt fører dPCR med menneskets genetiske materiale er et varmt emne. Her, indfører vi en metode til at registrere adenomatøs polypose coli (APC) somatiske mosaicisme ved hjælp af dPCR med formatet chip i rør, som giver mulighed for otte dPCR reaktioner skal gennemføres samtidigt. Bør udvises forsigtighed ved fylde- og forseglingmaskiner reaktionsblandingen på chips. Denne artikel viser, hvordan man undgår over- og undervurdering af positive partitioner. Desuden præsenterer vi en enkel procedure for indsamling dPCR produkt fra partitioner på de chips, som derefter kan bruges til at bekræfte den særlige forstærkning. Vi håber, at denne metoder betænkning vil bidrage til at fremme dPCR med metoden chip i rør i genetisk forskning.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved