En vævskultur Model af østrogen-producerende primære Bovine Granulosa-celler

Æggestokkene granulosa celler (GC) er den største kilde til estradiol syntese. Induceret af preovulatory luteiniserende hormon (LH) bølge, celler i theca og navnlig granulosa cellelag dybt ændre deres morfologiske, fysiologiske og molekylære karakteristika og danner progesteron-producerende corpus luteum, der er ansvarlig for at opretholde graviditeten. Celle kultur modeller er væsentlige værktøjer til at studere de underliggende lovgivningsmæssige mekanismer involveret i de folliculo-luteal transformation. Præsenteres protokollen fokuserer på isolation procedure og kryopræservering af kvæg GC fra små til mellemstore follikler (< 6 mm). Med denne teknik, kan en næsten ren population af GC opnås. Kryopræservering procedure i høj grad letter tid forvaltning af cellekultur arbejde uafhængigt af en direkte primære væv (æggestokke) levering. Denne protokol beskriver et serumfrit celle kultur model, der efterligner østradiol-aktiv status for kvæg GC. Vigtige betingelser, der er væsentlige for en vellykket steroid-aktive cellekultur er diskuteret i hele protokollen. Det er påvist, at øge plating tæthed af celler inducerer et specifikt svar som angivet af en ændret gen expression profil og hormon produktion. Endvidere, denne model giver et grundlag for yderligere undersøgelser af GC differentiering og andre programmer.