Arbovirus infektioner som Screening-værktøjer for identifikation af Viral hæmmende og vært Antiviral faktorer

RNA interferens- og genom redigering-baseret screening platforme har været meget anvendt til at identificere vært celle faktorer, der begrænser virus replikering. Disse skærme foregår typisk i celler, der er naturligt eftergivende til viral patogenet under undersøgelsen. Derfor, den robuste replikering af virus i kontrol betingelser kan begrænse det dynamiske område af disse skærme. Desuden kan disse skærme kunne nemt identificere cellulære forsvar veje, der begrænser virus replikering, hvis virus er veltilpasset til værten og i stand til at imødegå antiviral forsvar. I denne artikel vil beskrive vi et nyt paradigme for at udforske virus-værtssammenspil ved hjælp af skærme, at centrum på naturligt mislykkede infektioner af arboviruses såsom vesikulær stomatitis-virus (VSV). Trods VSV evne til at formere sig i en bred vifte af tovingede insekter og pattedyr værter gennemgår VSV en post post, mislykkede infektion i en række cellelinier stammer fra Lepidoptera insekter, som sigøjner møl (Lymantria dispar). Men disse forfejlede VSV infektioner kan blive "reddet" når værten celle antiviral forsvar er kompromitteret. Vi beskriver, hvordan VSV stammer kodning praktisk reporter gener og restriktive L. dispar cellelinjer kan parres set-up skærme til at identificere vært faktorer involveret i arbovirus begrænsning. Derudover viser vi også nytte af disse værktøjer, screening i identifikation af viralt kodede faktorer, der redde VSV replikering under coinfection eller gennem Ektopisk udtryk, herunder kodet af pattedyr vira. Den naturlige begrænsning af VSV replikering i L. dispar celler giver et højt signal / støj-forhold ved screening for de betingelser, der fremmer VSV redning, således at brugen af forenklede luminescence - og fluorescens-baseret assays til at overvåge ændringer i VSV replikering. Disse metoder er værdifulde for at forstå samspillet mellem vært antiviral svar og viral immun unddragelse faktorer.