Modellering tuberkulos i Mycobacterium marinum infekterade vuxna zebrafiskar

Mycobacterium tuberculosis är för närvarande den dödligaste mänskliga patogener som orsakar 1,7 miljoner dödsfall och 10,4 miljoner infektioner varje år. Exponering för denna bakterie orsakar ett brett sjukdom spektrum hos människor alltifrån en steriliserad infektion till ett aktivt progredierande dödliga sjukdom. Den vanligaste formen är den latent tuberkulos, som är asymtomatiska, men har potential att återaktivera in en fulminant sjukdom. Adult zebrafiskar och dess naturliga patogen Mycobacterium marinum har nyligen visat sig vara en tillämpliga modell att studera brett sjukdom spectrumen av tuberkulos. Ännu viktigare, kan spontana latens samt reaktivering och adaptiva immunsvaret i samband med mykobakteriella infektioner studeras i denna modell. I den här artikeln beskriver vi metoder för experimentell infektion av vuxen zebrafiskar, insamling av inre organ för utvinning av nukleinsyror för mätning av mykobakteriella laster och värd immunsvar med kvantitativ PCR. Den i egenutvecklade, M. marinum -specifik qPCR-analys är känsligare än de traditionella plätering metoderna som också upptäcker DNA från icke-Division, vilande eller nyligen döda mykobakterier. Som både DNA och RNA extraheras från en och samma individ, är det möjligt att studera relationerna mellan tillståndet sjuka och värd och patogen-genuttrycket. Den vuxna zebrafisk modellen för tuberkulos således presenterar sig som ett starkt gällande, icke däggdjur i vivo -system för att studera värd-patogen interaktioner.